如何減少免疫螢光檢測中細胞非特異性螢光染色

2021-04-20 20:40:52 字數 2141 閱讀 2587

1樓:匿名使用者

是封閉可以非特異性結合蛋白質的位點,也就是減少抗體(一抗和2抗都是蛋白質)的非特異性結合。

2樓:義翹神州加油

買廠家已經驗證過的特異性好的一抗(有圖有真相),這點最關鍵。

如何減少免疫螢光檢測中細胞非特異性螢光染色

3樓:匿名使用者

免疫組織化學又稱免疫細胞化學,是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的

免疫螢光中紅細胞的非特異染色,如何去除

4樓:匿名使用者

樓上的回答簡直胡說八道 牛頭不搭馬嘴

紅細胞自身會有自發螢光,因此免疫螢光要避免的話組織塊最好要灌注乾淨,把血管內的紅細胞都灌注乾淨,就能很好地避免紅細胞的非特異染色

5樓:梅儀巫馬書雙

買廠家已經驗證過的特異性好的一抗(有圖有真相),這點最關鍵。

我的螢光免疫染色出了什麼問題

直接免疫螢光和間接免疫螢光染色方法的異同

6樓:糖豆豆

1、接免疫螢光和間接免疫螢光染色方法的不同:

直接免疫螢光的實驗方案通常較短,因為它只需要乙個標記步驟。間接免疫螢光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。

直接免疫螢光方法的實驗方案步驟較少,更簡單。間接免疫螢光方法中必須選擇適當的二抗,增加了複雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出,每個二抗需要靶向不同的物種並偶聯至不同染料。

直接免疫螢光方法中獲得的訊號與間接方法相比可能較弱,因為直接方法中沒有使用二抗進行訊號放大。免疫螢光多個二抗結合一抗可使訊號放大。

2、直接免疫螢光和間接免疫螢光染色方法的相同之處:

免疫螢光 (if) 或細胞成像技術使用抗體將螢光染料(也稱為螢光素或螢光物)標記到特異性目標抗原上,所用螢光染料有諸如異硫氰酸螢光素 (fitc) 等。而通過化學方法偶聯螢光素的抗體被廣泛使用於if實驗中。

根據螢光素與一抗還是二抗偶聯,我們將 if 方法分為兩類:直接 if-使用單個抗體,該抗體直接指向目的靶標,一抗與螢光素直接偶聯;間接 if-使用兩個抗體,一抗未偶聯,螢光素偶聯的二抗指向一抗,並用於檢測。

間接法測抗體基本原理:

染色程式分為兩步,第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上,在溼盒中37℃保溫30min,使抗原抗體充分結合,然後洗滌,除去未結合的抗體。

第二步,加上螢光標記的抗球蛋白抗體或抗igg、igm抗體。如果第一步發生了抗原抗體反應,標記的抗球蛋白抗體就會和已結合抗原的抗體進一步結合,從而可鑑定未知抗體。

7樓:天蠍神經俠侶

免疫螢光細胞化學方法的原理是根據抗原抗體

免疫螢光染色檢測各基因的表達亮變化怎麼看出來的

8樓:匿名使用者

免疫組織化學又稱免疫細胞化學,是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性巧妙地結合起來,借助顯微鏡的現像和放大作用,在細胞,亞細胞水平檢測各種抗原物質,並可在原位顯示相應的基因和基因表達產物。免疫組織化學技術現已有:

免疫螢光組織(細胞)化學技術、免疫酶組織(細胞)化學技術、親和組織化學技術、免疫金銀及鐵標記免疫組織化學技術等。免疫螢光組織(細胞)化學技術是採用螢光素標記的已知抗體(或抗原)作為探針,檢測待測組織、細胞標本中的靶抗原(或抗體),形成的抗原抗體複合物上帶有螢光素,在螢光顯微鏡下,由於受高壓汞燈光源的紫外光照射,螢光素發出明亮的螢光,這樣就可以分辨出抗原(或抗體)的所在位置及其性質,並可利用螢光定量技術計算抗原的含量。以達到對抗原物質定位、定性、定量測定的目的。

細胞免疫螢光染色檢測英文怎麼說

9樓:北京索萊寶科技****

細胞免疫螢光

:cell immunofluorescence免疫細胞螢光:immunocytofluorescense免疫螢光染色內:容 immunofluorescent staining

免疫螢光細胞染色:immunofluorescence cell staining

細胞免疫螢光怎麼封片,細胞免疫螢光,求助

細胞bai 免疫螢光的詳細操作du步驟 1,取出細胞爬片zhi放到35mm或60mm用過的細dao胞培養皿裡,pbs洗三遍。注回意有的時候答作的細胞爬片可能比較小,因此夾取的時候要小心。2,4 多聚甲醛固定20分鐘,pbs洗三遍。3,0.2 triton x 100通透10分鐘,pbs洗三遍。4,與...

細胞免疫螢光和免疫螢光有什麼區別

1 蓋玻片節省抗體2 蓋玻片可以用高倍物鏡,拍攝的影象解析度更高。細胞鑑定是免疫螢光還是免疫組化 免疫組化和免疫螢光都是蛋白定位的檢測 也就是確定蛋白是表達在細胞核 漿 膜 免疫組織化學又稱免疫細胞化學,是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應抗原進行定...

免疫螢光染色技術可以用於原核細胞嗎

當然可以啦 和在真核細胞裡做沒有太大的區別,我能想到的大概就只有細胞膜的通透性或許有區別,可能要做特定的處理,剩下的有特定抗原然後選用特定一二抗應該就行了 免疫螢光染色的詳細步驟及應注意的細節 免疫螢光染色方法快捷,靈敏.標本是冰凍切片,還是石蠟切片?切片的厚薄?影響到一抗孵育的時間.選用較佳的一抗...