1樓:匿名使用者
1:蓋玻片節省抗體2:蓋玻片可以用高倍物鏡,拍攝的影象解析度更高。
細胞鑑定是免疫螢光還是免疫組化
2樓:北京索萊寶科技****
免疫組化和免疫螢光都是蛋白定位的檢測(也就是確定蛋白是表達在細胞核/漿/膜)。
免疫組織化學又稱免疫細胞化學,是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性巧妙地結合起來,借助顯微鏡的現像和放大作用,在細胞,亞細胞水平檢測各種抗原物質,並可在原位顯示相應的基因和基因表達產物。免疫組織化學技術現已有:
免疫螢光組織(細胞)化學技術、免疫酶組織(細胞)化學技術、親和組織化學技術、免疫金銀及鐵標記免疫組織化學技術等。免疫螢光組織(細胞)化學技術是採用螢光素標記的已知抗體(或抗原)作為探針,檢測待測組織、細胞標本中的靶抗原(或抗體),形成的抗原抗體複合物上帶有螢光素,在螢光顯微鏡下,由於受高壓汞燈光源的紫外光照射,螢光素發出明亮的螢光,這樣就可以分辨出抗原(或抗體)的所在位置及其性質,並可利用螢光定量技術計算抗原的含量。以達到對抗原物質定位、定性、定量測定的目的。
螢光原位雜交與免疫螢光有什麼區別
3樓:北京索萊寶科技****
螢光原位雜交與免疫螢光的區別:原位雜交是從分子水平檢測,免疫螢光是從蛋白水平檢測。
免疫螢光是利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。螢光原位雜交方法是一種物理圖譜繪製方法,使用螢光素標記探針,以檢測探針和**中期的染色體或**間期的染色質的雜交。
螢光原位雜交的原理:fish(fluorescence in situ hybridization)技術是一種重要的非放射性原位雜交技術。它的基本原理是:
如果被檢測的染色體或dna纖維切片上的靶dna與所用的核酸探針是同源互補的,二者經變性-退火-復性,即可形成靶dna與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標記上報告分子如生物素、地高辛,可利用該報告分。
免疫螢光的原理:免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由於抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的乙個因素,就可以查出另乙個因素。
免疫螢光技術就是將不影響抗原抗體活性的螢光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合後,在螢光顯微鏡下呈現一種特異性螢光反應。
4樓:華全動力集團
螢光原位雜交
螢光原位雜交方法是一種物理圖譜繪製方法,使用螢光素標記探針,以檢測探針和**中期的染色體或**間期的染色質的雜交。
免疫螢光
螢光抗體法。是一種將抗原、抗體的結合反應與形態學相結合的方法。該法把血清學的特異性、螢光色素的敏感性、顯微鏡檢查法集為一體,擴大了免疫學診斷的效果,是近代免疫學的一種重要研究手段。
抗體球蛋白標記上螢光色素,即成為螢光抗體。
細胞免疫螢光的幾個問題
5樓:匿名使用者
要看陽性復對照和陰性制對照,陰性對照沒有螢光,陽性對照有螢光,重複一次結果穩定的話就可以說是陽性了。樣品的稀釋度要看蛋白的表達量,用你們實驗室的標準protocol先做一遍,結果不好再優化條件。定量是可以的,要做westernblot和elisa,但也只是相對定量,不是絕對定量,把你檢測的結果儲存一張比較好的**,背景清晰,結果穩定的。
用影象軟體處理,把你空白對照組所出現的結果明暗度設定為1,在比較實驗組的結果,得出的百分比就是半定量的結果。
免疫螢光和免疫電鏡有何異同
6樓:匿名使用者
使得抗原復和抗體定位的研究進製入到亞細胞的水平。 而免疫bai螢光技du
術將免疫學方法(抗原zhi抗體特異結合)與螢光標記技dao術結合起來研究特異蛋白抗原在細胞內分布的方法。它主要分為兩大類,從而可對抗原進行細胞定位:一類是免疫凝集電鏡技術;另一類則是免疫電鏡定位技術,再經負染色直接在電鏡下觀察,即採用抗原抗體凝集反應後。
由於螢光素所發的螢光可在螢光顯微鏡下檢出,是在超微結構水平研究和觀察抗原檢測水平不一樣 免疫電鏡技術是免疫化學技術與電鏡技術結合的產物、抗體結合定位的一種方法學。免疫電鏡的應用
細胞免疫螢光,破膜哪個好些
7樓:匿名使用者
細胞免疫
螢光,copy破膜哪個好些
細胞免疫螢光的詳細操作步驟
1,取出細胞爬片放到35mm或60mm用過的細胞培養皿裡,pbs洗三遍。注意有的時候作的細胞爬片可能比較小,因此夾取的時候要小心。
2,4%多聚甲醛固定20分鐘,pbs洗三遍。
3,0.2%triton x 100通透10分鐘,pbs洗三遍。
4, 與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘,pbs洗三遍。
5.,一抗4度濕盒內過夜,也可37度2小時,感覺前者效果好,pbs洗三遍。
6,二抗室溫2小時,或者37度1半小時,pbs洗三遍。
7,最好用dapi染核,然後直接照螢光片。
8,蒸餾水洗掉pbs,甘油封片,指甲油封**的四周。
8樓:南京金益柏生物科技****
我們一般用0.2%的tritonx100,效果還不錯
細胞免疫螢光怎麼封片,細胞免疫螢光,求助
細胞bai 免疫螢光的詳細操作du步驟 1,取出細胞爬片zhi放到35mm或60mm用過的細dao胞培養皿裡,pbs洗三遍。注回意有的時候答作的細胞爬片可能比較小,因此夾取的時候要小心。2,4 多聚甲醛固定20分鐘,pbs洗三遍。3,0.2 triton x 100通透10分鐘,pbs洗三遍。4,與...
免疫螢光染色技術可以用於原核細胞嗎
當然可以啦 和在真核細胞裡做沒有太大的區別,我能想到的大概就只有細胞膜的通透性或許有區別,可能要做特定的處理,剩下的有特定抗原然後選用特定一二抗應該就行了 免疫螢光染色的詳細步驟及應注意的細節 免疫螢光染色方法快捷,靈敏.標本是冰凍切片,還是石蠟切片?切片的厚薄?影響到一抗孵育的時間.選用較佳的一抗...
免疫螢光染色mycmarker是怎樣的
1 空白對照 如抄果你做的是bai石蠟切片免疫組化,這個對照必須有,du目的是zhi看自發螢光dao,脫蠟後直接在螢光顯微鏡下觀察。2 陰性對照 標本直接滴加二抗,呈陰性反應。3 抗原對照 標本加同種動物的未免疫血清,以pbs沖洗後,在加抗免疫球蛋白螢光抗體。因未免疫動物的血清中無特異性抗體,應呈陰...