用於重組dna技術的質粒載體在結構上有什麼特點

2021-03-07 02:42:59 字數 2619 閱讀 6555

1樓:北京索萊寶科技****

重組dna技術的質粒載體的結構特點:

環狀,具有多個限制酶切點,便於限制酶切割。

複製起點,重組後可以複製讓外源基因能複製。

環狀dna分子能夠自我複製,或整合到染色體上,隨染色體複製。

有標記基因(便於進行檢驗)。

有標籤 便於最後分離純化蛋白用。

載體dna分子大小應適合,以方便操作。

對受體細胞無害,不影響受體細胞正常的生命活動。

載體大小:

大的質粒(大於15kb)不會很好轉化而且dna產量通常很低。在設計實驗時要考慮到加入插入片段的最終載體大小,盡量用更小的載體。

相容性當多於乙個質粒載體必須同時存在於同乙個細菌細胞中,這兩個質粒的複製子必須是相容的。當他們不能穩定地共存時,則認為這兩個質粒是不相容的。

選擇/檢測插入片段:

為了鑑別質粒中是否含有插入片段,對一些載體進行了工程改造,這樣產生的多位點接頭的分離會引起可見的表型。例如:lacz基因的應用(多位點接頭的分離會引用白細胞的生長而抑制藍細胞的生長,如pu19)和cccdb基因(調控細胞死亡)的應用(分離會促進細胞存活)。

篩選特徵:

選擇質粒載體的要素是要了解可用到的載體的特徵和**重組轉殖所用於的實驗。

所有的質粒載體都有三個共同的特徵:乙個複製子、乙個選擇性標誌和乙個轉殖位點。複製子是含有dna複製起始位點的一段dna(ori),也包括表達由質粒編碼的複製必需的rna和蛋白質的基因。

選擇性標誌對於質粒在細胞內持續存在時必不可少的。轉殖位點是限制性內切酶切割位點,外源性dna可由此插入質粒內,而且並不影響質粒的複製能力,或為宿主提供選擇性表型。

選擇性標誌:編碼抗生素抗性的基因對質粒載體來說是最普遍的細菌選擇性標誌(如pbr322);主要的抗生素選擇基因有:氨苄青黴素,氯黴素,四環素和卡那黴素四種。

轉化的宿主菌一般都是抗生素敏感型的,獲得質粒後,它能在有抗生素的平板上生長,從而達到篩選的要求。另乙個顯性的選擇標誌就是對λ噬菌體感染的免疫(也就是λ阻抑物)。有時也會用的一些隱性標誌,如leub-(亮氨酸存在時就不能生長)。

2樓:蠻燦真祺

特點如下:

1,環狀dna分子能夠自我複製,或整合到染色體上,隨染色體複製。

2,有多個限制酶切點(便於切割)。

3,有標記基因(便於進行檢驗)。

用於重組dna技術的質粒載體在結構上有什麼特點

3樓:北京索萊寶科技****

用於重組dna技術的質粒載體在結構上的特點:

環狀dna分子能夠自我複製,或整合到染色體上,隨染色體複製。

有多個限制酶切點(便於切割)。

有標記基因(便於進行檢驗)。

有標籤 便於最後分離純化蛋白用。

上面有標記基因,便於重組後的篩選。

有複製起點,重組後可以複製讓外源基因能複製。

質粒載體:

質粒載體 即,在由限制性核酸內切酶修飾過的質粒dna序列中插入外源的目的基因,以質粒為載體,將目的基因通過轉化或轉導的方法導進宿主細胞,進行重組、篩選、擴增的過程。

質粒載體篩選特點:

選擇質粒載體的要素是要了解可用到的載體的特徵和**重組轉殖所用於的實驗。

所有的質粒載體都有三個共同的特徵:乙個複製子、乙個選擇性標誌和乙個轉殖位點。複製子是含有dna複製起始位點的一段dna(ori),也包括表達由質粒編碼的複製必需的rna和蛋白質的基因。

選擇性標誌對於質粒在細胞內持續存在時必不可少的。轉殖位點是限制性內切酶切割位點,外源性dna可由此插入質粒內,而且並不影響質粒的複製能力,或為宿主提供選擇性表型。

選擇性標誌:編碼抗生素抗性的基因對質粒載體來說是最普遍的細菌選擇性標誌(如pbr322);主要的抗生素選擇基因有:氨苄青黴素,氯黴素,四環素和卡那黴素四種。

轉化的宿主菌一般都是抗生素敏感型的,獲得質粒後,它能在有抗生素的平板上生長,從而達到篩選的要求。另乙個顯性的選擇標誌就是對λ噬菌體感染的免疫(也就是λ阻抑物)。有時也會用的一些隱性標誌,如leub-(亮氨酸存在時就不能生長)。

種植綠葉菜的日光溫室在結構上有何特點?

4樓:中國農業出版社

日光溫室在寒冷的冬季最低溫度比露地能高20℃,最冷月份晴天的中午前後室內版溫度一般可達30℃。能形成如此特殊權的小氣候條件,主要是由於溫室有1公尺厚的北牆和東西山牆,0.5公尺厚的由保溫性強的秸稈、草苫等鋪設成的仰角在40°角以上的後屋面。

它們具有較好的防寒作用,外面的冷空氣、室內的熱空氣不易穿透。另外這樣厚的牆體和後坡尤如乙個大的吸熱體,白天把溫室內的熱量貯存在牆體內,夜間放苫後再慢慢地向外釋放,使室溫不至降得過低。

無滴膜的採用可以使溫室的透光率比有滴膜增加10%,3公尺的脊高(溫室最高點)和7公尺的跨度(從溫室北牆內側到溫室最南端)構成乙個合理的透光屋面,主要進光面與水平面呈25°左右。使冬季83%的光線能夠進入室內,提高室溫。草苫厚度要求達到5厘公尺,草苫外面還可加一層防雨膜,既保溫又防雨雪。

正是由於結構的改進,使日光溫室在寒冷的北方冬季室內能生產出夏季果菜來。這樣的條件更適宜生產耐寒和喜溫的綠葉菜。

基因工程技術也稱為DNA重組技術,其實施必須具備的條件是

a 限制酶 dna連線酶 運載體 目的基因和受體細胞是基因工程中的必需具備的條件,a正確 b 重組dna是由目的基因和質粒重組形成的,rna聚合酶是轉錄需要的酶,細胞中具有該種酶,因此不是基因工程必需的條件,b錯誤 c 質粒是運載體中的一種,除了質粒還有動植物病毒和噬菌體衍生物,因此質粒不是基因工程...

轉殖和質粒構建是做什麼的,構建質粒載體的大體步驟是什麼

質粒是現代分 bai子生物學du中常用的載體之一,質粒構建,zhi就dao是指把特定 的基因序列插入內到工程質粒容中。但僅僅插入質粒是不夠的,還需要把質粒轉化到細菌 細胞或酵母中,使質粒在其中擴充套件或表達。以細菌為例,轉化後的細菌還需塗佈到平板,使之分散為單個細菌,在合適的條件下培養,單個細菌長成...

關於dna重組技術(基因工程)的問題,高中生物

梧桐化雨 它所識別的dna序列是指切口處,而不是整個基因,基因怎麼可能那麼短呢,識別到這樣的切口序列後在特定的位點切下去,露出粘性末端,然後有相同粘性末端的基因片段就可以接上了。替換的部分至少要是一個基因且是外源基因,這樣的話才可能使外源基因的以表達 遮天連葉 是末端一樣,而不是整個都一樣。如果不一...