基因工程構建基因表達載體用到質粒的原因

2021-03-03 21:38:46 字數 2749 閱讀 7807

1樓:匿名使用者

質粒幫助運輸目的基因進入受體細胞

2樓:匿名使用者

質粒是包含有dna的,這樣就可以成為載體,另外由於質粒本身就屬於胞器,與原細胞融合度非常高,所以適合作為基因表達載體。可載性、融合度高。

基因工程構建基因表達載體的問題

3樓:字元與標點

我估計這個構建是利用你提到的酶切位點在你所說的「特定啟動子」和「終止子」之間插入目的基因,這樣一來,如果構建成功,就會破壞了原來位於該「特定啟動子」和「終止子」之間的四環素抗性基因,即「目的基因-載體連線物」不具有四環素抗性。又因為青黴素抗性基因在該特定啟動子和終止子之外,無論構建是否成功,都不會影響青黴素的抗性。綜上,「目的基因-載體連線物」的受體細胞具有青黴素抗性但不具有四環素抗性。

因此,可以首先利用青黴素抗性篩選出全部連線產物(在青黴素抗性培養基上可以存活),然後再利用四環素抗性進行篩選剔除「載體-載體連線物」(這種連線沒有破壞原有的四環素抗性)。也就是說所有既抗青黴素又抗四環素的都丟掉,只留下只抗青黴素不抗四環素的轉殖。不知道這樣說你明白了嗎?

4樓:匿名使用者

1.用青黴素培養基和四環素培養基培養得到質粒.

2.用該切酶切提取的質粒

3.走dna電泳膠, 如果是目的基因-載體連線物,可以看到目的基因被切得條帶.

基因工程中構建表達載體為什麼要用抗性基因標記

5樓:匿名使用者

基因工程是否成功就是看基因能否被成功表達,如果把表達載體用帶有螢光或放射性的元素標記上,那麼表達載體一旦被發現,就表明基因能成功轉錄翻譯。 所以標記基因是為了判斷基因能否表達,也可以用於刪選成功表達基因的細胞~

6樓:匿名使用者

用抗性基因是為了鑑定受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來

基因工程基因表達載體的構建為什麼用標記基因就能篩選充足dna,其中如果含有標記基因但不含目的基因

7樓:匿名使用者

建議你回去好好看看基因工程的書吧,真是無語了。在基因工程中的載體有兩種,一種是轉殖載體,一種是表達載體。你在選擇載體時就會選擇有標記基因的載體,連上目的基因後,塗板再進行菌斑鑑定,只有檢測到你目的基因的載體才進行搖菌轉殖,然後提質粒再做測序來鑑定目的基因是否連線正確。

你這流程都沒看懂吧

8樓:匿名使用者

所以還要挑單轉殖鑑定。

9樓:匿名使用者

要進行兩輪篩選。。。。你說的情況第二輪會被剔除

為什麼基因工程中構建基因表達載體是插入啟動子和終止

10樓:匿名使用者

為什bai麼基因工程中構建基因表達du載體是zhi插入啟動子和終dao

止scrna:scrna(**all cytopla**ic rna,細胞質版小權rna)主要位於細胞質內,種類較多,參與蛋白質的合成和運輸。srp顆粒就是一種由乙個7srna和六種蛋白質組成的核醣核蛋白體顆粒,主要功能是識別訊號肽, 並將核醣體引導到內質網。

端體酶rna

端體酶rna(telomeraserna),它與染色體末端的複製有關。端體酶rna

反義rna

反義rna(antisenserna),它參與基因表達的調控。

上述各種rna分子均為轉錄的產物,mrna最後翻譯為蛋白質,而rrna、trna及snrna等並不攜帶翻譯為蛋白質的資訊,其終產物就是rna。

構建基因表達載體的原因

11樓:臭粑耙

如果我沒記錯的話應該是生物選修三的內容吧,基因工程部分表達載體是必須構造的,一般為質粒(小型環狀dna)如果沒有表達載體你想要植入基因是不能實現的,先用限制性內切酶切開質粒,然後將基因插入,在用dna連線酶連線上,記住連線酶和限制酶作用的部位是相同的

然後植物的就用花粉管通道法,動物就用顯微注射法,然後就等目的基因表達吧應該會產生所需的蛋白質等產物

純手工,望採納!

12樓:匿名使用者

單獨的基因片段轉進細胞裡面是沒法進行表達的 質粒上有其表達所需的啟動原件

回答有關基因工程的問題:(1)構建基因工程表達載體時,用不同型別的限制酶切割dna後,可能產生粘性末端

13樓:美亭

(1)用限制bai酶切割dna後,可du能產生黏性末端,也可zhi能產dao生平口末端.若要版在限制酶基因工權程中,往往採用同種限制酶切割目的基因和質粒以產生相同的黏性末端,再用dna連線酶使其直接進行連線.

(2)rna聚合酶識別和結合的部位是啟動子.將目的基因匯入微生物細胞時,常用ca2+處理微生物細胞,使其成為易於吸收周圍環境中dna分子的感受態細胞,以利於表達載體進入.為了檢測目的基因是否轉錄出了mrna,可採用分子雜交技術,即用放射性同位素標記的胰島素基因作探針與mrna雜交;了檢測目的基因轉錄的mrna是否翻譯成蛋白質,可採抗原--抗體雜交技術.

(3)採用農桿菌轉化法將目的基因匯入植物細胞時,先要將目的基因插入農桿菌ti質粒的t-dna中,然後用該農桿菌感染植物細胞,通過dna重組將目的基因插入植物細胞的染色體dna上.

故答案為:

(1)平 相同

(2)提供rna聚合酶特異性識別結合位點,驅動基因轉錄 ca2+dna-rna分子雜交 胰島素原(蛋白質)

(3)t-dna 染色體

質粒作為基因工程常用載體必須具備的條件

三個條件 1 能在宿主細胞內複製並穩定儲存 2.具有多個限制酶切位點 方便剪下 3.具有標記基因 有利於檢測 轉殖載體 轉殖位點,複製子,標記基因 表達載體 啟動子,終止子,多轉殖位點,複製子,標記基因 在宿主細胞內較穩定,能複製便於篩選 方便進行插入,剪下等基因操作 最基本的,要有足夠大的拷貝數 ...

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