1樓：匿名使用者
因野生型的質粒上存在其他的基因，有可能影響作為載體時的功能。當前使用的作為載體的質粒幾乎都是經人工改造過後的質粒。（抱歉，目前只記得這些）
2樓：匿名使用者
因為作為載體必修具有某些標記基因 而野生型質粒本身不具備這些基因
所以必須通過人工改造才能用於基因工程
3樓：匿名使用者
一是得加入標記基因，如安苄青黴素，便於篩選重組細胞。還要刪去非啟回
動子、終答止子等複製必須的基因，給目的基因騰出空間，因為如果插入目的基因可能會導致質粒過大，若過大則質粒在宿主細胞內的穩定性，質粒複製分離的完整性等等可能會受到影響。具體改造的話就是用酶切法
基因工程載體的噬菌體載體
4樓：偷星
λ噬菌體由頭和尾構成，其基因組是長約49kb的線性雙鏈dna分子，組裝在頭部蛋白質外殼內部，其序列已被全部測出。λ噬菌體感染時，通過尾管將基因組dna注入大腸桿菌，而將其蛋白質外殼留在菌外。dna進入大腸桿菌後以其兩端12bp的互補單鏈粘末端環化成環狀雙鏈，可以兩種不同的方式繁殖（圖2）：
①溶菌性方式（lytic pathway）：在營養充足，條件適合細菌繁殖時，利用宿主菌中的酶類和原料，λdna上基因可按調控的順序表達合成構成噬菌體頭、尾和尾絲所需的各種蛋白質，λdna經多次複製合成許多子代λdna，於是裝配成許多子代的λ噬菌體，最後裂菌，釋放出許多新的λ噬菌體。②溶原性方式（lysogenic pathway）：
進入細菌的λdna可整合(integrate）入細菌的染色質dna中，隨細菌染色體dna複製，傳給細菌後代，這個穩定潛伏在細菌染色質dna中的λdna稱為原噬菌體(prophage)，含有原噬菌體的細菌稱為溶源菌(lysogen)。λdna的整合是可逆的，原噬菌體可從宿主dna中切出，進入溶菌性方式的繁殖。
圖2 λ噬菌體的溶菌和溶原繁殖方式
λ噬菌體整個基因組如圖3所示，可分為三個部分，①左臂：從a到j長約20kb，其中的基因編碼構成頭部、尾部、尾絲對組裝完整噬菌體所需要的蛋白質。②中段：
長約20kb，是λdna整合和切出，溶原生長所需的序列。③右臂：長約10kb，是調控區，控制溶菌和溶原生長最重要的調控基因和序列、以及λdna複製起始均在這區域內。
左右臂包含λdna複製、噬菌體結構蛋白合成、組裝成熟噬菌體、溶菌生長所需全部序列；對溶菌生長來說，中段是非必需的。 利用λ噬菌體作載體，主要是將外來目的dna替代或插入中段序列，使其隨左右臂一起包裝成噬菌體，去感染大腸桿菌，並隨噬菌體的溶菌繁殖而繁殖。現在廣泛使用的λ噬菌體載體也是已作過許多人工改造的，主要的改造是：
①設計去除λdna上的一些限制性酶切點。這是因為λdna較大，序列中的限制性酶切點過多，妨礙其應用。②在中段非必需區，替換插入某些標誌基因如上述的可供藍白篩選laci-lacz』序列，和多轉殖位點等。
由此可構建出兩類λ噬菌體作載體；一類是插入型載體，可將外來序列插中段，常用的λgt系列載體，一般容許插入5-7kb外來dna；另一類是轉換型載體，即可用外來dna替代中段，如imbl系列載體。
圖3 野生型λ噬菌體dna及相應的λ噬菌體dna圖譜
插入或置換中段外來的dna長度是有一定限制的，當噬菌體dna長度大於野生型λ噬菌體基因組105%或小於78%時，包裝而成的噬菌體存活力顯著下降。所以λ噬菌體載體可插入長5-20kb的外來dna，這比質粒載體能插入的dna長得多；而且包裝的λ噬菌體感染大腸桿菌要比質粒轉化細菌的效率高得多，所以λ噬菌體載體常用於構建cdna文庫或基因組文庫。但λ噬菌體載體的轉殖操作要比質粒載體複雜。
如果將左右臂和中段都去除，僅留下λdna而端包裝噬菌體所必需的cos序列，再加上質粒的複製序列、標誌基因、多轉殖位點等，就可構成cos質粒或稱為粘粒的載體。粘粒可插入45kb長的外源dna，然後用λ噬菌體外殼蛋白包裝成噬菌體，感染大腸桿菌後，粘粒的dna能以質粒的形式在細菌中繁殖而被轉殖。所以粘粒主要用於dna文庫的構建。
基因工程中重組質粒怎麼形成
pbr322質粒是一種什麼樣的載體粘粒質粒噬菌體
5樓：匿名使用者
載體種類：質粒、噬菌體、腺病毒載體、逆轉錄病毒載體 質粒特點： 存在於細菌染色體外的小型環狀dna分子。
具有自我複製功能。 帶有抗性基因及表型識別等遺傳性標記物。 經改造後具有多轉殖位點。
舉例：pmd-18t質粒、pucl9質粒、pbr322質粒等
在基因工程中,常用人工構建的質粒作為載體.人工構建的質粒可以集多種有用的特徵於一體,如含多種單一酶切位點、抗生素耐藥性等.常用的人工質粒運載體有pbr322、psc101.
pbr322含有抗四環素基因(tcr)和抗氨苄青黴素基因(apr),並含有27種限制性內切酶的單一識別位點.如果將dn**段插入ecori切點,不會影響兩個抗生素基因的表達.但是如果將dn**段插入到hind iii、bam h i 或 sal i切點,就會使抗四環素基因失活.
這時,含有dna插入片段的pbr322將使宿主細菌抗氨苄青黴素,但對四環素敏感.沒有dna插入片段的pbr322會使宿主細菌既抗氨苄青黴素又抗四環素,而沒有pbr322質粒的細菌將對氨苄青黴素和四環素都敏感.psc101與pbr322相似,只是沒有抗氨苄青黴素基因和psti切點.
質粒運載體的最大插入片段約為10 kb(kb表示為千鹼基對). 2023年,科學家將質粒作為基因的載體使用,為基因工程的誕生奠定了基礎.最常用的質粒是大腸桿菌的質粒.
這種質粒常含有抗生素抗性基因,例如,卡那黴素抗性基因
噬菌體與cos作載體有何區別 30
6樓：匿名使用者
1. 噬菌
噬菌體（phage）是感染細菌的一類病毒，有的噬菌體基因組較大，加入λ噬菌和t噬菌體等；有的則較小，如m13、f1、fd噬菌體等。用感染大腸桿菌的λ噬菌體改造成的載體應用最為廣泛。
λ噬菌體由頭和尾構成，其基因組是長約49kb的線性雙鏈dna分子，組裝在頭部蛋白質外殼內部，其序列已被全部測出。λ噬菌體感染時，通過尾管將基因組dna注入大腸桿菌，而將其蛋白質外殼留在菌外。dna進入大腸桿菌後以其兩端12bp的互補單鏈粘末端環化成環狀雙鏈，可以兩種不同的方式繁殖：
①溶菌性方式（lytic pathway）：在營養充足，條件適合細菌繁殖時，利用宿主菌中的酶類和原料，λdna上基因可按調控的順序表達合成構成噬菌體頭、尾和尾絲所需的各種蛋白質，λdna經多次複製合成許多子代λdna，於是裝配成許多子代的λ噬菌體，最後裂菌，釋放出許多新的λ噬菌體。②溶原性方式（lysogenic pathway）：
進入細菌的λdna可整合(integrate）入細菌的染色質dna中，隨細菌染色體dna複製，傳給細菌後代，這個穩定潛伏在細菌染色質dna中的λdna稱為原噬菌體(prophage)，含有原噬菌體的細菌稱為溶源菌(lysogen)。λdna的整合是可逆的，原噬菌體可從宿主dna中切出，進入溶菌性方式的繁殖。
λ噬菌體整個基因組可分為三個部分，①左臂：從a到j長約20kb，其中的基因編碼構成頭部、尾部、尾絲對組裝完整噬菌體所需要的蛋白質。②中段：
長約20kb，是λdna整合和切出，溶原生長所需的序列。③右臂：長約10kb，是調控區，控制溶菌和溶原生長最重要的調控基因和序列、以及λdna複製起始均在這區域內。
左右臂包含λdna複製、噬菌體結構蛋白合成、組裝成熟噬菌體、溶菌生長所需全部序列；對溶菌生長來說，中段是非必需的。
利用λ噬菌體作載體，主要是將外來目的dna替代或插入中段序列，使其隨左右臂一起包裝成噬菌體，去感染大腸桿菌，並隨噬菌體的溶菌繁殖而繁殖。現在廣泛使用的λ噬菌體載體也是已作過許多人工改造的，主要的改造是：①設計去除λdna上的一些限制性酶切點。
這是因為λdna較大，序列中的限制性酶切點過多，妨礙其應用。②在中段非必需區，替換插入某些標誌基因如上述的可供藍白篩選laci-lacz』序列，和多轉殖位點等。由此可構建出兩類λ噬菌體作載體；一類是插入型載體，可將外來序列插中段，常用的λgt系列載體，一般容許插入5-7kb外來dna；另一類是轉換型載體，即可用外來dna替代中段，如imbl系列載體。
插入或置換中段外來的dna長度是有一定限制的，當噬菌體dna長度大於野生型λ噬菌體基因組105%或小於78%時，包裝而成的噬菌體存活力顯著下降。所以λ噬菌體載體可插入長5-20kb的外來dna，這比質粒載體能插入的dna長得多；而且包裝的λ噬菌體感染大腸桿菌要比質粒轉化細菌的效率高得多，所以λ噬菌體載體常用於構建cdna文庫或基因組文庫。但λ噬菌體載體的轉殖操作要比質粒載體複雜。
如果將左右臂和中段都去除，僅留下λdna而端包裝噬菌體所必需的cos序列，再加上質粒的複製序列、標誌基因、多轉殖位點等，就可構成cos質粒或稱為粘粒的載體。粘粒可插入45kb長的外源dna，然後用λ噬菌體外殼蛋白包裝成噬菌體，感染大腸桿菌後，粘粒的dna能以質粒的形式在細菌中繁殖而被轉殖。所以粘粒主要用於dna文庫的構建。
2. cos質粒載體
co**id 是英文 cos site-carrying pla**id 的縮寫, 本意是帶有粘性末端位點的質粒, 因此, 柯斯質粒是人工建造的的含有λdna的cos序列和質粒複製子的特殊型別的質粒載體。
柯斯質粒的構建一般都是利用質粒的複製子、選擇標記, 加上λ的cos位點序列及與包裝有關的序列，構建的科斯質粒可以很好地用於基因轉殖。
早期構建的科斯質粒載體有一些不足，如轉殖位點較少，抗性標記單一，容栽能力不大，後來進行了一些改進，克服了這些不足。
可用來進行基因轉殖載體改造的改造的生物材料有 哪些
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