重組質粒如果匯入的受體細胞就是本來含有這種質粒的細菌體內,是否無法進行檢驗目的基因的匯入是否成功

2021-04-18 23:15:34 字數 1417 閱讀 3474

1樓:匿名使用者

一般來說,操作時所用的受體細胞都不是原來提供質粒的細胞,也就是說受體細胞本身不會含有那一類標記基因。

2樓:匿名使用者

重組質粒如果含有目的基因,受體細胞內該質粒不含有目的基因的話,可以檢測的。

3樓:如風飄搖

既然是重組質粒就和該細菌體內的質粒不同了,而且檢測的是重組質粒上的標記基因,所以不會影響檢測結果!

將目的基因匯入受體細胞的方法有那些?

4樓:聽風

常用方法:基因工程中常用的受體細胞有大腸桿菌,枯草桿菌,土壤農桿菌,酵母菌和動內植物細胞等。其中容,對於細菌或植物細胞,常用質粒作為載體將目的基因匯入細胞內;動物細胞則用顯微注射的方法將目的基因匯入動物受精卵的雄性原核中。

過程:用人工方法使體外重組的dna分子轉移到受體細胞,主要是借鑑細菌或病毒侵染細胞的途徑。例如,如果運載體是質粒,受體細胞是細菌,一般是將細菌用氯化鈣處理,以增大細菌細胞壁的通透性,使含有目的基因的重組質粒進入受體細胞。

目的基因匯入受體細胞後,就可以隨著受體細胞的繁殖而複製,由於細菌的繁殖速度非常快,在很短的時間內就能夠獲得大量的目的基因。

5樓:善解__人衣彡

匯入植copy物細胞

:農桿菌轉化法**基因抗蟲棉用的是花粉管通道法);匯入動物細胞:顯微注射技術(注射入受精卵中);匯入原核生物:

一般是將細菌用氯化鈣處理,以增大細菌細胞壁的通透性,使含有目的基因的重組質粒進入受體細胞。

6樓:匿名使用者

dna分子雜交技術

bai:

用同位素標記的目du的基zhi因片段作探針,與受體染色dao體dna進行雜交。

版近年來研究權者常採用pcr-southern雜交技術,即先對被檢測的材料進行pcr擴增,然後再用目的基因的同源探針與擴增產物進行雜交。

再採用rt-pcr檢測轉錄產物,即以受體總rna或mrna為模板進行逆轉錄合,然後再進行pcr擴增,如果得到特異的cdna擴增條帶,則表明目的基因實現了轉錄。

最後還需在翻譯水平上驗證表達,常進行wester blotting,將經sds-page分離的蛋白質樣品通過電轉移到硝酸纖維素膜上,用待定蛋白質的初級抗體與膜上吸附的蛋白質進行免疫反應,再與酶標記的第二抗體反應,通過二抗上標記酶催化的顯色反應,就可以鑑定目的基因表達的特異蛋白質產物。

檢測受體細胞中是否匯入了目的基因,到底是分子雜交,還是用標記基因

7樓:匿名使用者

檢測目的基因是否匯入受體細胞,用到的是dna的分子雜交技術.標記基因是用於篩選的

專.比如是匯入的重組質粒中有青屬黴素抗性基因,那個沒有匯入重組質粒的細菌不能再含有青黴素的培養基上存活,這樣剩下的都是匯入重組質粒的細菌.

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