做了原核表達,表達量很低,求助,做蛋白在真核細胞的表達,但是表達量很低,怎麼解決

2021-04-20 16:50:36 字數 1569 閱讀 9243

1樓:匿名使用者

抄蛋白不表達,表達量低原因分析

原核表達表達量低,原因有多方面的,但是只要蛋白有表達就行,其他條件可以優化。原核表達是目前體外蛋白表達最常用的表達系統,主要是用大腸桿菌表達系統去表達蛋白,表達量低原因可以從以下幾個方面分析:1表達條件,因為你現在已經有表達,可以通過優化一下表達條件,說不定就可以提供表達量了,主要從iptg誘導濃度,培養的溫度,轉化的感受態細胞等方面都做個對比。

2密碼子優化赫爾mrna結構優化大腸桿菌系統是有自己的密碼子偏愛性的,由於密碼子的簡併性,我們可以改變基因序列而蛋白質是不變的,mrna的結構也會蛋白蛋白不表達或表達量低。你的話先建議從這兩方面考慮的額,其他原因可見文件:

樓上的回答感覺是答非所問吶,du知道君的智慧型化還需要提高啊

做蛋白在真核細胞的表達,但是表達量很低,怎麼解決

2樓:匿名使用者

做蛋白在真核細胞的表達,但是表達量很低,怎麼解決實際上真核生物的蛋白也可以用

內真核細胞容蛋白表達系統來實現,而且效果往往更好。

用原核生物來表達主要還是因為操作簡單,快速。如果希望表達和純化的蛋白性質穩定,經原核系統表達之後仍然有正確的摺疊構象,那麼使用原核表達系統就很合適了。

有的時候在不同的表達體系裡面對蛋白的表達量是有影響的。

當構建完成後攜帶有訊號肽的時候,一些蛋白在真核表達體系中表達量極低。去除訊號肽序列值後,直接表達成熟肽,表達水平明顯提高。

所以說構建的真核表達載體高表達mrna卻檢測不到目的蛋白是完全有可能的。

我做了表達實驗,但卻沒有目標蛋白的表達,為什麼

3樓:東邊更美

做蛋bai白在真核細胞的表達du,但是表達量很低,怎麼zhi解決實際上dao真核生物的蛋白專

也可以用真核細屬胞蛋白表達系統來實現,而且效果往往更好。

用原核生物來表達主要還是因為操作簡單,快速。如果希望表達和純化的蛋白性質穩定,經原核系統表達之後仍然有正確的摺疊構象,那麼使用原核表達系統就很合適了。

有的時候在不同的表達體系裡面對蛋白的表達量是有影響的。

當構建完成後攜帶有訊號肽的時候,一些蛋白在真核表達體系中表達量極低。去除訊號肽序列值後,直接表達成熟肽,表達水平明顯提高。

所以說構建的真核表達載體高表達mrna卻檢測不到目的蛋白是完全有可能的。

求助:真核還是原核表達

關於原核表達問題,新手求助!

4樓:匿名使用者

你可以分別跑全菌體、上清,細胞裂解後再離心得到的上清也跑電泳。全菌體加上樣緩衝液煮沸就可以了

真核過表達質粒,原核過表達質粒的區別急求

一 指代不同 1 真核過表達質粒 真核細胞表達載體之一為pegfp n1載體,具有對方面的優點。pegfp n1載體上攜帶有egfp蛋白表達基因。2 原核過表達質粒 能攜帶插入的外源核酸序列進入原核細胞中進行表達的載體。二 特性不同 1 真核過表達質粒 該質粒具有很強的複製能力,可以滿足隨宿主細胞 ...

原核生物基因表達的調控,闡述原核生物基因表達調控途徑

camp 正調控機制好像是葡萄糖效應 葡萄糖含量公升高,camp結合受體蛋白crp和capcap 分解代謝無啟用蛋白 cap camp複合物正調控 闡述原核生物基因表達調控途徑 這個題目在微生物學上是整整一章的內容,所以要想詳細敘述太難了,我大概給你列出吧。轉錄水平調控 1.操縱子的轉錄調控 2.分...

Ppar是核表達還是胞漿表達

復染細胞核,常規用過的是dapi進行細胞核覆染 藍色 目的回是為了鑑別目的蛋白的答位置是胞核表達,還是胞質表達或胞膜表達。一般來講,如果是胞核表達,會和藍色的細胞核顏色重疊 胞質或胞膜表達則不會重合,單獨看目的蛋白的表達,會看到有個黑色的空洞的,尤其細胞影象更為明顯。從樓主的 看,貌似是在胞核表達 ...