想測試基因的MRNA表達量,用什麼方法最好?如果是原位雜

2021-03-27 06:30:06 字數 2228 閱讀 1003

1樓:匿名使用者

對於基因蛋白表達的定量一般不會用到原位雜交和免疫組化,這兩個方法的優點是更加直觀,但定量困難,適合用作定性實驗。個人認為定量實驗檢測最好用rt-pcr進行核酸層面的檢測,或者用免疫學方法直接檢測蛋白量,比如elisa等;蛋白電泳(包括2d)可以進行半定量的實驗。另外定量實驗要注意的是選擇合適的內參,電泳要注意平衡好上樣量。

2樓:匿名使用者

rt-pcr可以半定量測mrna表達量,想更精確一些,可以用real-time pcr。

免疫組化和原位雜交的區別

3樓:淵源

免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(螢光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術。

原位雜交是指將特定標記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交,從而對特定核酸順序進行精確定量定位的過程。原位雜交可以在細胞標本或組織標本上進行。

mrna的含量等同於表達量嗎?用原位雜交檢測檢測準確還是pcr準確?或者免疫組化?

4樓:

不能說等同。來。

只是能作為

自表達量的一種bai表現形式,實際du

上是轉錄水

zhi平的表達量dao

狹義的表達量應該是成熟蛋白的量

原位雜交和pcr都不準確,研究的目的不同,原位雜交是看形態學上(非細胞學)的各個部位表達量**錄水平),這個實驗挺難做的。。。。。。qpcr是對某一組織的表達量**錄水平),和northern blot的目的幾乎一樣,卻別在於pcr快捷,容易量化,但沒有northern直接,也就沒有northern準確。

免疫組化就是蛋白水平了。對於表達量來說這個比較直接,是針對蛋白的。其實如果有合適手段的話,最直接的是檢測蛋白活力,蛋白活力對於表達量這個概念是最接近的的。

免疫組化和原位雜交的區別

5樓:北京索萊寶科技****

原位雜交是基

於核酸水平,免疫組化是基於蛋白水平,互不干擾,

為什麼檢測某種蛋白的表達都用免疫組化和原位雜交l呢

6樓:百浩生物

原位雜交是檢測基因的,如dna或者rna,不過這個技術有些落後,誤差比較大,是比較老的技術了。而免疫組化是進行蛋白定位的,這兩種技術可靠性都比較差,但因為操作簡單,成本也不太高,在以前是比較常用的,免疫組化只能進行半定量。elisa可以精確定量,但對抗體要求高,臨床的試劑盒可信,但科研用的,質量差別太大,成本也很高。

檢測表達用western blotting可靠性高一些,因為有分子量大小指標,難以做假。

全自動免疫組化和原位雜交染色系統屬於什麼分類

7樓:匿名使用者

原位雜交是基於核酸水平

,免疫組化是基於蛋白水平,互不干擾,

如果沒有好的抗體,原位雜交不失一種選擇,但對某些實驗室來說,老闆可能還考慮到成本,特別是比較大量的樣品的表達的時候,用傳統的原位雜交比免疫組化來得便宜。另外,如果你研究的是mirna之類的話,免疫組化是無能為力,你只能用原位雜交看定位了。

免疫組化和原位雜交組織化學的關鍵技術在**?

8樓:匿名使用者

原位雜交組織

化學(抄

baiin situ hybridization histochemistry, ishh)是應用已知鹼基順序並du帶有標記物的核酸探針與組織、細zhi胞中dao待測的核酸按

鹼基互補配對的原則進行特異性結合,形成雜交體,然後再應用與標記物相應的檢測系統,通過組織化學或免疫組織化學方法在核酸原有的位置進行細胞定位。

免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(螢光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術

醫生要求做免疫組化和原位雜交,這是不是就是癌症啊

9樓:匿名使用者

你好,要求完善免疫組化和原位雜交,可能是為了了解是否有感染等情況,不一定是懷疑有癌變的。

pcr中基因的對照組相對表達量為1是什麼意思

那就是有其他的基點,或者計算方法不一樣 搬運過來的 組織特異性的qrt pcr怎麼計算表達量 qrt pcr 是一種應用廣泛的研究基因表達模式的方法,尤其是在樣品量少 為什麼螢光定量pcr對照組相對表達還會有bar值 螢光定量pcr會加入帶抄有螢光基團襲的探針,bai探針是能和目的基因結合的單 鏈d...

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潛龍勿用,原指懷才不遇。這首歌則賦予了其全新的含義。不知道很多有著漂亮女朋友的男生會不會覺得自己雖然捧著鑽石,卻需要面對眾人貪婪的眼光。潛龍勿用 則代表著這種感覺的迸發。讓人恨也不能,愛亦不能,陷入兩難境地,最終導致癲狂,以後寧願你不是人 有著良好對稱寫詞習慣的林夕,藉著謝霆鋒的喉,這樣發洩著內心的...

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