真核生物中分離到的完整的基因片段與表達載體構成的重組質粒轉化入大腸桿菌後,不能獲得表達的原因

2021-03-27 21:23:37 字數 3223 閱讀 7191

1樓:匿名使用者

大腸桿菌為原核生物,原核生物的基因序列中不含有內含子,也就沒有內含子的剪下機制,而真核生物中獲得的完整的基因片段中一定是含有內含子的,(mrna中不含)所以,在表達上會有差異。

2樓:匿名使用者

你用的是什麼載體?

如果想讓其蛋白質在大腸桿菌中大量表達 用原核表達載體比較好

3樓:匿名使用者

大腸桿菌是原核生物。不能合成真核生物的蛋白質,往這方面想

乙個真核生物的基因在大腸桿菌中不能得到高效表達,可能的原因有哪些

4樓:沙古麗菲絲

沒有接在啟動子後面,或者用連線酶連線的時候把兩個或以上相同的該基因接在了一起。

為什麼較複雜的基因(如真核細胞的基因)不能在大腸桿菌中體現?

5樓:舒良國

因為真核細胞的基因結構中含有內含子,而內含子是不編碼蛋白質的,所以較複雜的基因不能在大腸桿菌中體現

6樓:卿聽點水

真核的基因有外顯子和內含子的分別,而且兩者是間隔排列的,只有外顯子才能編碼成熟蛋白,真核蛋白需要經過比較複雜的修飾才能合成蛋白,而原核蛋白就簡單得多了直接按基因合成就行了所需的修飾很少。

真核生物中存在質粒嗎?或質粒只存在與原核生物中嗎?

7樓:聚焦百態生活

真核生物中存在質bai粒,質粒並不du是只zhi存在與原核生物中。

質粒廣dao泛存在於生專物界,細菌、

屬植物、動物等生物體中都含有質粒,真核生物與原核生物中都含有質粒。質粒具有自主複製能力,使其在子代細胞中也能保持恆定的拷貝數,並表達所攜帶的遺傳資訊,但質粒的功能可自行丟失或人工處理而消除。

8樓:禾鳥

真核生物中存在

質粒,質粒不僅僅只存在與原核生物中。

質粒(pla**id)廣泛存在於生

版物界,從細菌、放線菌、絲狀真權菌、大型真菌、酵母到植物,甚至人類機體中都含有。細菌質粒是基因工程中最常用的載體。

質粒不是細菌生長繁殖所必需的物質,可自行丟失或人工處理而消除,如高溫、紫外線等。

擴充套件資料

質粒的特點:

1、質粒具有自主複製能力,使其在子代細胞中也能保持恆定的拷貝數,並表達所攜帶的遺傳資訊。

2、細菌質粒是dna重組技術中常用的載體。從分子構型看,有線型質粒、也有環狀質粒,表型多種多樣。

3、嚴緊控制複製型質粒的複製酶系與染色體dna複製共用,只能在細胞週期的一定階段進行複製,當細胞染色體停止複製時,質粒也不再複製。

質粒轉化大腸桿菌的目的?

9樓:匿名使用者

質粒是真核細胞bai細胞核外或原核生物du擬核區外能夠進行自zhi主複製的遺傳

dao單位,包括真核專生物的細胞器(屬主要指線粒體和葉綠體)中和細菌細胞擬核區以外的環狀脫氧核糖核酸(dna)分子。現在習慣上用來專指細菌(大腸桿菌)、酵母菌和放線菌等生物中細胞核或擬核中的dna以外的dna分子。在基因工程中質粒常被用做基因的載體(vector)。

許多細菌除了擬核中的dna外,還有大量很小的環狀dna分子,這就是質粒(pla**id)(補充:部分質粒為rna)。質粒上常有抗生素的抗性基因,例如,四環素抗性基因或卡那黴素抗性基因等。

有些質粒稱為附加體(episome),這類質粒能夠整合進真菌的染色體,也能從整合位置上切離下來成為游離於染色體外的dna分子。質粒在宿主細胞體內外都可複製!

通過個些特性,人們可以把一些目的dn**斷構建在質粒中,通過轉化入大腸桿菌中,不斷的複製,來得到目的產物。這就是轉化的目的。

10樓:嗚咔咔

你這問的具體是什麼意思?

連線上目的基因的質粒轉化大腸桿菌是為了讓目的基因在大腸桿菌裡擴增然後得到表達啊。

11樓:匿名使用者

樓主的問題問抄的有些不明白bai。

質粒是原核生物du的細胞質中游離的環狀dna雙鏈結構,zhi由於構造簡單等dao特點,常常用於基因工程的載體,即將目的基因匯入到質粒中,然後將重組質粒匯入到受體細胞中去,目前比較成熟的是匯入到原核生物中去,諸如大腸桿菌,這樣,大腸桿菌就能表達我們所需要的形狀。

ti質粒的起源是什麼啊

轉殖載體與基因片段重組,與表達載體與基因片段重組,最後匯入動物體內,哪個更好呢?

12樓:匿名使用者

轉殖載體主要是用來進行dna的重組、目的基因的分離和純化等等。

而表達載體主要是進行目標基因的真核或者原核表達。

兩種載體的用途不同各有優勢,如果你想要做蛋白的表達,那麼就選用表達載體比較好。

13樓:匿名使用者

轉殖載體只是為了分離得到某個基因,表達載體是為了目的基因表達,各有實驗目的,用途不同,所以無法比較

基因原核表達的詳細過程

質粒圖譜怎麼看

14樓:匿名使用者

第一步:首先看ori的位置,了解質粒的型別(原核/真核/穿梭質粒)

ori的箭頭指複製方向,其他元件標註的箭頭多指轉錄方向(正向)。

第二步:再看篩選標記,如抗性,決定使用什麼篩選標記:

(1)ampr:水解β-內醯胺環,解除氨苄的毒性。

(2)tetr :可以阻止四環素進入細胞。

(3)camr:生成氯黴素羥乙醯基衍生物,使之失去毒性。

(4)neor(kanr):氨基糖苷磷酸轉移酶,使g418(卡那黴素衍生物)失活。

(5)hygr:使潮黴素β失活。

第三步:看多轉殖位點(mcs)。它具有多個限制酶的單一切點,便於外源基因的插入。

如果在這些位點外有外源基因的插入,會導致某種標誌基因的失活,而便於篩選。決定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。

第四步:再看外源dna插入片段大小。質粒一般只能容納小於10kb的外源dn**段。一般來說,外源dn**段越長,越難插入,越不穩定,轉化效率越低。

第五步:是否含有表達系統元件,即啟動子-核醣體結合位點-轉殖位點-轉錄終止訊號。這是用來區別轉殖載體與表達載體。

轉殖載體中加入一些與表達調控有關的元件即成為表達載體。選用那種載體,還是要以實驗目的為準繩。

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