斐林試劑和雙縮脲試劑使用的區別

2022-03-23 12:11:54 字數 739 閱讀 9295

1樓:三林之精銳

斐林試劑和雙縮脲試劑都由naoh溶液和cuso4溶液組成,但二者有如下三點不同:

(1)溶液濃度不同

斐林試劑中naoh溶液稱為斐林試劑甲,其濃度為0.1g/ml,cuso4溶液稱為斐林試劑乙,其濃度為0.05g/ml;雙縮脲試劑中naoh溶液(雙縮脲試劑a)的濃度為0.

1g/ml,cuso4溶液(雙縮脲試劑b)的濃度為0.01g/ml。

(2)使用原理不同

斐林試劑是新配製的cu(oh)2溶液,它在加熱條件下與醛基反應,被還原成磚紅色的cu2o沉澱,可用於鑑定可溶性還原糖的存在。用斐林試劑鑑定可溶性還原糖時,溶液的顏色變化過程為:淺藍色→棕色→磚紅色(沉澱)。

鑑定生物組織中是否含有蛋白質時,常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑,發生的是雙縮脲反應。雙縮脲反應實質是在鹼性環境下的cu2+與雙縮脲試劑發生的紫色反應。而蛋白質分子中含有很多與雙縮脲(h2noc-nh-conh2)結構相似的肽鍵,所以蛋白質都能與雙縮脲試劑發生顏色反應,可以用雙縮脲試劑鑑定蛋白質的存在。

(3)使用方法不同

斐林試劑使用時,先將 naoh溶液和cuso4溶液混合(將4~5滴cuso4溶液滴入2mlnaoh溶液中),而後立即使用:雙縮脲試劑使用時,先加入naoh溶液(2ml),振盪搖勻,造成鹼性的反應環境,然後再加入3~4滴cuso4溶液,振盪搖勻後觀察現象。

2樓:尉典羽天睿

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不能用斐林試劑是因為斐林試劑需要水浴加熱,會改變自變數,對實驗結果造成影響。如果是 酶的專一性,不能選用澱粉和碘液,因為酸性條件下澱粉會水解。斐林試劑是二價銅離子的酒石酸鉀鈉配合物,可以被脂肪醛或還原性糖還原為氧化亞銅。斐林試劑為深藍色溶液,在與脂肪醛或還原性糖共熱時,藍色消失,析出紅色的氧化亞銅沉...