液相色譜儀的作用,液相色譜儀的原理是什麼?用來幹什麼?

2021-08-07 11:34:26 字數 4760 閱讀 4239

1樓:匿名使用者

色譜法也叫層析法,它是一種高效能的物理分離技術,將它用於分析化學並配合適當的檢測手段,就成為色譜分析法。

色譜法的最早應用是用於分離植物色素,其方法是這樣的:在一玻璃管中放入碳酸鈣,將含有植物色素(植物葉的提取液)的石油醚倒入管中。此時,玻璃管的上端立即出現幾種顏色的混合譜帶。

然後用純石油醚沖洗,隨著石油醚的加入,譜帶不斷地向下移動,並逐漸分開成幾個不同顏色的譜帶,繼續沖洗就可分別接得各種顏色的色素,並可分別進行鑑定。色譜法也由此而得名。

現在的色譜法早已不侷限於色素的分離,其方法也早已得到了極大的發展,但其分離的原理仍然是一樣的。我們仍然叫它色譜分析。

一、色譜分離基本原理:

由以上方法可知,在色譜法中存在兩相,一相是固定不動的,我們把它叫做固定相;另一相則不斷流過固定相,我們把它叫做流動相。

色譜法的分離原理就是利用待分離的各種物質在兩相中的分配係數、吸附能力等親和能力的不同來進行分離的。

使用外力使含有樣品的流動相(氣體、液體)通過一固定於柱中或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面。當流動相中攜帶的混合物流經固定相時,混合物中的各組分與固定相發生相互作用。

由於混合物中各組分在性質和結構上的差異,與固定相之間產生的作用力的大小、強弱不同,隨著流動相的移動,混合物在兩相間經過反覆多次的分配平衡,使得各組分被固定相保留的時間不同,從而按一定次序由固定相中先後流出。與適當的柱後檢測方法結合,實現混合物中各組分的分離與檢測。

二、色譜分類方法:

色譜分析法有很多種類,從不同的角度出發可以有不同的分類方法。

從兩相的狀態分類:

色譜法中,流動相可以是氣體,也可以是液體,由此可分為氣相色譜法(gc)和液相色譜法(lc)。固定相既可以是固體,也可以是塗在固體上的液體,由此又可將氣相色譜法和液相色譜法分為氣-液色譜、氣-固色譜、液-固色譜、液-液色譜

希望這些能對你有幫助。。

2樓:秒懂百科

液相色譜儀:對混合物進行先分離,而後分析鑑定的儀器

3樓:

用來分析液體混合物的

液相色譜儀的原理是什麼?用來幹什麼?

4樓:匿名使用者

液相色譜儀的原理:

儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配係數,在兩相中作相對運動時,經過反覆多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電訊號傳送到記錄儀,資料以圖譜形式列印出來。

主要用於對高沸點、難氣化合物的混合物通過色譜柱核淋洗劑並以實現分離。應用於生物化學、生物醫學、環境化學、石油化工等部門。

液相色譜儀根據固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(llc)及液-固色譜(lsc)。現代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統、溫度控制系統、色譜柱、檢測器、訊號記錄系統等部分組成。與經典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點。

高效液相色譜儀主要有進樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和資料處理系統。

進樣系統

一般採用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作,進樣量是恆定的。這對提高分析樣品的重複性是有益的。

輸液系統

該系統包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強為l.47~4.4x10pa,流速可調且穩定,當高壓流動相通過層析柱時,可降低樣品在柱中的擴散效應,可加快其在柱中的移動速度,這對提高解析度、**樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。

分離系統

該系統包括色譜柱、連線管和恆溫器等。色譜柱一般長度為10~50cm(需要兩根連用時,可在二者之間加一連線管),內徑為2~5mm,由"優質不鏽鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料製成,住內裝有直徑為5~10μm粒度的固定相(由基質和固定液構成)。

固定相中的基質是由機械強度高的樹脂或矽膠構成,它們都有惰性(如矽膠表面的矽酸基因基本已除去)、多孔性(孔徑可達1000?)和比表面積大的特點,加之其表面經過機械塗漬(與氣相色譜中固定相的製備一樣),或者用化學法偶聯各種基因(如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等)或配體的有機化合物。

5樓:我弄丟一個人

液相色譜儀系統是由由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。

液相色譜儀的原理:儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配係數,在兩相中作相對運動時,經過反覆多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電訊號傳送到記錄儀,資料就可以以圖譜形式列印出來,以便研究人員分析。

液相色譜儀的用途:

在聚合物的分析中,吸附色譜一般用來分離新增劑,如偶氮染料、抗氧化劑、表面活性劑等,也可用於石油烴類的組成分析。

用於氨基酸、蛋白質的分析,也適合於某些無機離子(no3-、so42-、cl-等無機陰離子和na+、ca2+、mg2+、k+等無機陽離子)的分離和分析,具有十分重要的作用。

適用於水溶液的體系,又適用於有機溶劑的體系。當所用的洗脫劑為水溶液時,稱為凝膠過濾色譜,其在生物界的應用比較多。

拓展回答:

液相色譜儀的應用:高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的範圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量範圍的物質。與試樣預處理技術相配合,hplc所達到的高解析度和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離複雜相體中的微量成分。

隨著固定相的發展,有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離hplc成為解決生化分析問題最有前途的方法。由於hplc具有高解析度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反覆利用,流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。

6樓:匿名使用者

液相色譜儀的原理:

液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統、溫度控制系統等組成,是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而後分析鑑定的儀器。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配係數,在兩相中作相對運動時,經過反覆多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電訊號傳送到記錄儀,資料以圖譜形式列印出來。

應用:高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的範圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量範圍的物質。與試樣預處理技術相配合,hplc所達到的高解析度和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離複雜相體中的微量成分。

隨著固定相的發展,有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離hplc成為解決生化分析問題最有前途的方法。由於hplc具有高解析度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反覆利用,流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。

液相色譜-質譜連用技術受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等;液相色譜-紅外光譜連用也發展很快如在環境汙染分析測定水中的烴類,海水中的不揮發烴類,使環境汙染分析得到新的發展。

系統組成及特點:

1、進樣系統

一般採用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作,進樣量是恆定的。這對提高分析樣品的重複性是有益的。

2、輸液系統

該系統包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強為l.47~4.4x10pa,流速可調且穩定,當高壓流動相通過層析柱時,可降低樣品在柱中的擴散效應,可加快其在柱中的移動速度,這對提高解析度、**樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動相貯存器和梯度儀,可使流動相隨固定相和樣品的性質而改變,包括改變洗脫液的極性、離子強度、ph值,或改用競爭性抑制劑或變性劑等。

這就可使各種物質(即使僅有一個基團的差別或是同分異構體)都能獲得有效分離。

3、分離系統

該系統包括色譜柱、連線管和恆溫器等。色譜柱一般長度為10~50cm(需要兩根連用時,可在二者之間加一連線管),內徑為2~5mm,由"優質不鏽鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料製成,住內裝有直徑為5~10μm粒度的固定相(由基質和固定液構成).固定相中的基質是由機械強度高的樹脂或矽膠構成,它們都有惰性(如矽膠表面的矽酸基因基本已除去)、多孔性(孔徑可達1000)和比表面積大的特點,加之其表面經過機械塗漬(與氣相色譜中固定相的製備一樣),或者用化學法偶聯各種基因(如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等)或配體的有機化合物。因此,這類固定相對結構不同的物質有良好的選擇性。

例如,在多孔性矽膠表面偶聯豌豆凝集素(psa)後,就可以把成纖維細胞中的一種糖蛋白分離出來。

另外,固定相基質粒小,柱床極易達到均勻、緻密狀態,極易降低渦流擴散效應。基質粒度小,微孔淺,樣品在微孔區內傳質短。這些對縮小譜頻寬度、提高解析度是有益的。

根據柱效理論分析,基質粒度小,塔板理論數n就越大。這也進一步證明基質粒度小,會提高解析度的道理。

再者,高效液相色譜的恆溫器可使溫度從室溫調到60c,通過改善傳質速度,縮短分析時間,就可增加層析柱的效率。

7樓:退休之前

儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配係數,在兩相中作相對運動時,經過反覆多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電訊號傳送到記錄儀,資料以圖譜形式列印出來。

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