蛋白質為什麼可以用有機溶劑沉澱,提純蛋白質時鹽析法與有機溶劑法的優缺點

2022-03-19 03:09:45 字數 1872 閱讀 4917

1樓:雨落星晴海

有機溶劑能降低溶液的電解常數,從而增加蛋白質分子上不同電荷的引力,導致溶解度的降低。另外有機溶劑與水的作用能破壞蛋白質的水化膜,故蛋白質在一定濃度的有機溶劑中的溶解度差異而分離的方法稱「有機溶劑分段沉澱法」,它常用於蛋白質或酶的提純。

2樓:匿名使用者

我估計他們是認為有些有機溶劑可以與水混溶,降低了蛋白質在水中的溶解度,從而使蛋白質沉澱。

3樓:子衿王

這是萃取的一種方法,應為蛋白質溶於有機溶劑但有機溶劑不溶於水

提純蛋白質時鹽析法與有機溶劑法的優缺點

4樓:留遐思侍醜

鹽析是加入了濃的可溶性鹽溶液,下降了蛋白質的溶解度而使蛋白質析出,屬於物理程序。有機溶劑、重金屬離子是使蛋白質變性,喪失其生理活性。鹽析的蛋白質加水可溶解,而變性後的蛋白質不會恢復。

5樓:韓小飛

1、鹽析法 優點是鹽析法簡單方便,可用於蛋白質抗原的粗提、丙種球蛋白的提取、蛋白質的濃縮等。缺點是鹽析法提純的抗原濃度不高,只用於抗原的初步純化。

2、有機溶劑沉澱法

優點是是分辨能力比鹽析法高,溶劑容易除去且可**,沉澱的蛋白質不需要脫鹽處理,缺點是有機溶劑易使蛋白質或酶變性,常採用降低溫度的方法進行有效控制,而且有機溶劑使用量大,溶劑的使用及**;儲存都比較困難或麻煩。

6樓:恨海狂人梅文俊

從細胞中提取出來的生物大分子是不純淨的,必須進一步分離純化才能獲得純品。在生物大分子製備工作中,分離純化是比較複雜和重要的乙個環節。

對於異類的物質,如提純蛋白質和酶時混雜著核酸,提純核酸時混雜著蛋白質或多醣,一般可用專一性酶水解、有機溶劑抽提、選擇性分部沉澱等方法處理,小分子物質常在整個製備過程中多次液相與固相互相轉化被分離或最後用透析方法除去。

而對同類物質,如酶和雜蛋白,rna和dna以及不同結構的蛋白質、酶、核酸之間的分離,情況則複雜得多,主要應用的方法有鹽析法、有機溶劑沉澱法、等電點沉澱法、吸附法、結晶法、電泳法、超速離心法、柱層析法等。其中鹽析法、等電點法、結晶法用於蛋白、酶的提純較多;有機溶劑抽提和沉澱用於核酸提純較多;柱層析法、梯度離心法在蛋白質和核酸的提純工作中應用均十分廣泛。

有機溶劑是如何使蛋白質變性的?

7樓:w別y雲j間

「蛋白質的變性」是指蛋白質分子中的次級鍵被破壞。主要是氫鍵和離子鍵。甲醇、乙醇、丙酮等有機溶劑可以提供自己的羥基或羰基上的氫或氧去形成氫鍵,從而破壞了蛋白質中原有的氫鍵,使蛋白質變性。

而引起蛋白質沉澱的原因一方面是由於甲醇、乙醇、丙酮等有機溶劑加入水中使溶劑介電常數降低,增加了相反電荷的吸引力,另一方面是因為這些有機溶劑是強親水試劑,爭奪蛋白質分子表面的水化水,破壞蛋白質膠體分子表面的水化層而使分子聚集沉澱。

溶劑按化學組成分為有機溶劑和無機溶劑。

有機溶劑是一大類在生活和生產中廣泛應用的有機化合物,分子量不大,它存在於塗料、粘合劑、漆和清潔劑中。經常使用有機溶劑如,苯乙烯、全氯乙烯、三氯乙烯、乙烯乙二醇醚和三乙醇胺。

有機溶劑是能溶解一些不溶於水的物質(如油脂、蠟、樹脂、橡膠、染料等)的一類有機化合物,其特點是在常溫常壓下呈液態,具有較大的揮發性,在溶解過程中,溶質與溶劑的性質均無改變。

有機溶劑的種類 有機溶劑的種類較多,按其化學結構可分為10大類:①芳香烴類:苯、甲苯、二甲苯等;②脂肪烴類:

戊烷、己烷、辛烷等;③脂環烴類:環己烷、環己酮、甲苯環己酮等;④鹵化烴類:氯苯、二氯苯、二氯甲烷等;⑤醇類:

甲醇、乙醇、異丙醇等;⑥醚類:乙醚、環氧丙烷等;⑦酯類:醋酸甲酯、醋酸乙酯、醋酸丙酯等;⑧酮類:

丙酮、甲基丁酮、甲基異丁酮等;⑨二醇衍生物:乙二醇單甲醚、乙二醇單乙醚、乙二醇單丁醚等;⑩其他:乙腈、吡啶、苯酚等。

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