提取大腸桿菌DNA為什麼不直接提取細胞核中進行提取的DNA而要從細胞質的質粒中提取

2021-05-05 18:53:03 字數 1279 閱讀 1951

1樓:匡雅霜

基因組dna可以提取,質粒dna也可以提取,要看你需要的目的基因是位於基因組上還是質粒上,要哪個部分就提取哪個部分。

在基因工程中,質粒是乙個非常理想的載體,大部分的目的基因會先匯入到質粒中進行擴增,所以提取質粒dna的情況會經常遇到,這可能給你造成了錯覺。

2樓:匿名使用者

大腸桿菌沒有細胞核,只有擬核和質粒dna。

在基因工程中,質粒是乙個非常理想的載體,大部分的目的基因會先匯入到質粒中進行擴增,所以一般提取質粒dna。

大腸桿菌基因組dna提取和質粒dna提取的異同點

3樓:匿名使用者

提取的步驟基本上都屬dna的提取步驟,包括細胞裂解,dna釋放,純化,最後沉澱溶解.

質粒提取過程中,有乙個dna變性、復性的過程,這個與基因組提取完全不同,這是利用質粒是以超螺旋結構存在於大腸桿菌中的特殊狀態,分離純化質粒時總是會利用這個特點來分離基因組dna與質粒dna.

大腸桿菌質粒dna怎樣提取,用什麼方法

4樓:睡完這輩子

鹼裂解法:此方法適用於小量質粒dna的提取,提取的質粒dna可直接用於酶切、pcr擴增、銀染序列分析。方法如下:

1、接1%含質粒的大腸桿菌細胞於2ml lb培養基。

2、37℃振盪培養過夜。

3、取1.5ml菌體於ep管,以4000rpm離心3min,棄上清液。

4、加0.lml溶液i(1%葡萄糖,50mm/l edta ph8.0,25mm/l tris-hcl ph8.0)充分混合。

5、加入0.2ml溶液 ii(0.2 mm/l naoh,1% sds),輕輕翻轉混勻,置於冰浴5 min 。

6、加入0.15m1預冷溶液iii(5 mol/l kac,ph4.8),輕輕翻轉混勻,置於冰浴5 min 。

7、以10,000rpm離心20min,取上清液於另一新ep管

8、加入等體積的異戊醇,混勻後於?0℃靜置10min。

9、再以10,000rpm離心20min,棄上清。

10、用70%乙醇0.5ml洗滌一次,抽乾所有液體。

11、待沉澱乾燥後,溶於0.05mlte緩衝液中

怎麼判斷從大腸桿菌中提取的質粒dna,是環狀的還是線狀的?

5樓:亓楣風

可以在高倍顯微鏡下觀察啊

應該是最簡單最直接的了額

我們上次的實驗就是用油鏡觀察細胞內的染色體形態

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