做MTT檢測法時,粘有MTT的DMSO灑在手上了,怎麼辦

2021-04-19 18:08:56 字數 862 閱讀 9524

1樓:瑪雅試劑

立即去除,脫掉被汙染的衣物,用水清洗**,若**刺激或皮疹,需要就醫。mt t噻唑蘭。

mtt法操作步驟

2樓:匿名使用者

(1)單細胞懸來液接種於96孔培養

自板;103-104細胞/孔,每孔培養基總量200微公升(96孔培養板每孔容積370微公升),37℃、5%

co2培養箱中培養一段時間(根據實驗目的決定培養時間)(2)加入2毫克/毫公升的mtt液(50微公升/孔);繼續培養3小時。

(3)吸出孔內培養液後,加入dmso液(150微公升/孔),將培養板置於微孔板扳蕩器上振盪10分鐘,使結晶物溶解。

(4)酶標儀檢測各孔od值(檢測波長570奈米)。記錄結果,繪製

mtt比色法細胞活力檢測實驗中有哪些注意事項?

3樓:匿名使用者

博凌科為解答:(1)選擇適當的細胞接種濃度。一般情況下,96孔培養板的內貼壁細胞長滿時約有lo6個細胞。

但由於不同細胞貼壁後面積差異很大,因此,在進行mtt比色法細胞活力檢測實驗前,掌握每一種細胞的貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線,確定實驗中每孔的接種細胞數和培養時間,以保證培養終止致細胞過滿。這樣,才能保證形成酌量的mtt結晶,與細胞數量呈線性關係。 (2)避免血清干擾。

用含15%胎牛血清培養液培養細胞時,高濃度的血清物質會影響實驗孔的光吸收值。由於實驗本底增加,會使實驗敏感。因此,一般選擇濃度小於10%胎牛血清的培養液進行。

在呈色後,盡量吸淨培養孔內殘餘培養液。3)設空白對照。與實驗孔平行設不加細胞只加培養液的空白孔。

其它實驗步驟保持一致。最後比色時,以空白孔調零。

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