如何用實驗證明抗體是免疫球蛋白??求技術帝!!給個大概的思路

2021-03-27 14:36:13 字數 966 閱讀 8387

1樓:匿名使用者

做一下免疫球蛋白電泳實驗吧:

免疫電泳

—免疫球蛋白鑑定

免疫電泳是將電泳與雙向瓊脂擴散相結合的一種抗原分析方法。根據抗原中各蛋白質組分的電荷和分子量大小不同,在電場作用下有不同的遷移率,從而可將混合物中各種不同組分分開。實驗時,將被檢抗原樣品先放在瓊脂板的小孔中進行電泳分離,再在其平行方向開槽,加入已知抗體,進行雙向擴散。

當相應抗原、抗體比例合適時,即形成白色沉澱弧,根據沉澱弧的數量、位置和形態,即可分析樣品中所含的抗原成分及其性質。

二、器材與試劑

1.器材

電泳儀、電泳槽

打孔器、挖槽刀和圖形卡

載玻片、定量吸管和吸耳球

毛細管有蓋搪瓷溼盒

煮沸水浴箱

2.試劑

(1)1.2%瓊脂凝膠(2)生理鹽水(3)抗原(4)抗體(5)ph8.6, 0.05m巴比妥緩衝液

(三)操作步驟:

用定量吸管吸取熱瓊脂3.5ml,平鋪於載玻片上。待凝固後,按圖形卡,用打孔器打孔,用針挑去孔內瓊脂。

用毛細管將抗原(血清)加入小孔中,將瓊脂板放入ph8.6, 0.05m巴比妥緩衝液的電泳槽中,兩端用四層紗布搭橋,電泳時電壓可調至110v,電泳45~60分鐘。

從電泳槽中取出瓊脂板,用刀片按圖在兩孔之間挖一小槽,用針挑去槽內瓊脂,在槽內加入抗抗全血清抗體。

將載玻片置於搪瓷溼盒內,進行擴散24~48小時後觀察結果。

四、操作注意事項

澆載玻片時,瓊脂面要盡量鋪平。

加樣時應一次加滿,並防止樣品溢位孔外。

五、實驗結果記錄與分析

畫出各孔間的沉澱線位置、數量、形態,並予以簡要的說明。

2樓:彼岸花開到荼靡

用市售抗免疫球蛋白的抗體做個western雜交

3樓:匿名使用者

直接有檢測蛋白質的方法不就知道啦,elasa等方法~

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