1樓：匿名使用者
1rna為單鏈，其結構不穩定，較易變性，故提取時應注意。
2（1)提取真核生物dna用鳥槍法獲得其目標dna，（2）用相同的dna內切酶處理大腸桿菌質粒。
（3）將目的dna與大腸桿菌質粒在dna連線酶種處理，使得兩者結合。
4真核生物其mrna形成需要加工，真核生物先形成hnrna，經過加工後形成mrna，兒原核生物則沒有加工過程。
5你可以用dnaman這個軟體幫助設計，將你所要的鹼基順序輸入，在用其pcr引物設計，就可以了。
2樓：匿名使用者
1.周圍環境中的rnase相當多，而且很難降解，就算高溫高壓滅菌也不一定能清除乾淨，因此分離純化rna時使用的槍頭，離心管都必須是rnase free的，如果沒有，就要自己用depc處理以後再使用，最好使用的槍也是單獨一套不要跟提取dna的槍混用以防止rnase汙染，切記不能裸手觸控槍頭、離心管等物品。
2.看你要轉殖什麼區域了，如果是orf區，最好從cdna文庫裡擴增，片段如果比較大，一定要選用品質好一點的高保真酶，擴增迴圈數不用太多，以防止出現突變。如果是其他區域要抽提genomic dna，但是擴增以後要用切膠**，以防止genomic dna汙染。
3.如果出現非特異條帶可以提高退火溫度試一試，一般出現這個情況有可能是設計引物的問題，模板不好也有可能
4.原核表達一般用於比較簡單的不需要複雜加工的蛋白，因為原核表達系統裡沒有這些加工元件，而真核表達系統多用於表達有複雜結構或比較大的蛋白
5.你這個問題太不專業了，你要擴增多大的序列用於表達，用什麼載體？什麼酶切位點？這些都是設計引物所必須考慮的
3樓：匿名使用者
3.出現非特異條帶的原因有:1.引物錯誤(序列較短 引物內部或引物間有互補序列)2.復性溫度太低
解決方法:1.重新設計引物2.摸索最佳復性條件
分子生物學問答題求助！
4樓：匿名使用者
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故名思議,內切,就是核酸酶從核苷酸鏈如dna鏈中間 即內部 切開,這樣的核酸酶就是內切核 內酸酶,外切容,作用於核酸鏈的兩端 幾個鹼基或者一小段 就是核酸酶從與核酸鏈相互作用,如在dna複製過程中,從dna聚合酶新增dntp的一段切去幾個或者一小段核苷酸,這樣的酶就叫外切核酸酶,有5 3 和3 5 ...
生物化學與分子生物學碩士在讀，發現自己已經開始討厭甚至憎恨實
首先必須說一下，你想多了。第一 工作與專業對的上的比例很低 不算專業對口的銷售 第二 做為公司裡分子生物學實驗室工作的一員，必須提醒你，實驗室的工資低 重複性的工作不是很多人的期待，所以碩士 博士畢業了進公司很多事做銷售。建議 1.堅持 堅持 再堅持拿到碩士畢業證 如果感覺再堅持會死人的，立即放棄，...