SDSPAGE樣品上樣前為什麼要加熱

2021-03-03 20:43:06 字數 1036 閱讀 2430

1樓:北京索萊寶科技****

蛋白質電泳前,需用樣品緩衝液處理,樣品緩衝液中除sds外,還有還原劑β-巰基乙醇,它可將蛋白質分子中的s-s(二硫鍵)還原.電泳樣品製備時加熱,就是為了加速這些組分與蛋白質的反應.

2樓:匿名使用者

你好, 作用原理:聚丙烯醯胺凝膠為網狀結構,具有分子篩效應。它有兩種形式:

非變性內聚丙烯醯胺凝膠電泳(容native-page)及sds-聚丙烯醯胺凝膠(sds-page);非變性聚丙烯醯胺凝膠,在電泳的過程中,蛋白質能夠保持完整狀態,並依據蛋白質的分子量大小、蛋白質的形狀及其所附帶的電荷量而逐漸呈梯度分開。

而sds-page僅根據蛋白質亞基分子量的不同就可以分開蛋白質。該技術最初由shapiro於2023年建立,他們發現在樣品介質和丙烯醯胺凝膠中加入離子去汙劑和強還原劑(sds即十二烷基硫酸鈉)後,蛋白質亞基的電泳遷移率主要取決於亞基分子量的大小(可以忽略電荷因素)。希望能幫到你。

sds-page樣品上樣前為什麼要加熱?

3樓:美和

蛋白質電泳前,需用樣品緩衝液處理,樣品緩

衝液中除sds外,還有還原劑β-巰基乙

專醇,它可將蛋白質

屬分子中的s-s(二硫鍵)還原。電泳樣品製備時加熱,就是為了加速這些組分與蛋白質的反應。

問一下你們試驗提取的是不是總蛋白?還是特定的一種蛋白?我想應該是提的總蛋白,那麼就應該做到:

盡量提取完全;應使所有蛋白全部處於溶解狀態;防止發生蛋白的降解、聚集、沉澱、變性。看看你的目的蛋白的特性,是親水性的還是疏水性的,再決定留上清還是沉澱,如你的樣品是蛋白質沉澱物,加入50--100ul的sds加樣緩衝液並在同樣加熱後在上樣

sds-page樣品上樣前為什麼要加熱

4樓:北京索萊寶科技****

蛋白質電泳前,需用樣品緩衝液處理,樣品緩衝液中除sds外,還有還原劑β-巰基乙醇,它可將蛋白質分子中的s-s(二硫鍵)還原.電泳樣品製備時加熱,就是為了加速這些組分與蛋白質的反應.

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