酶聯免疫吸附劑測定簡介,酶聯免疫吸附測定的原理是什麼?

2025-06-08 00:20:58 字數 2439 閱讀 8996

酶聯免疫吸附測定的原理是什麼?

1樓:努力的佐佐

原理是抗原與抗體之間的特異性結合。酶聯免疫吸附是在固相載體上包被好能與目的抗原特異性結合的抗體,當檢測樣本中含有目的抗原時,其會與固相載體上的抗體相結合,並加入和鏈結化學發光酶,通過沖洗去掉其他非目的抗原,加入顯色底物與之反應,此時吸光度越大也就是顏色越深的就說樣本中明目的抗原越多,沒有顏色反應的就是不含有目的抗原。

酶聯免疫吸附測定,是指利用抗體分子能與抗原分子特異性結合的特點,將遊離的雜蛋白和結合於固相載體的目的蛋白結合,並利用特殊的標記物對其定性或定量分析的一種檢測方法。其原理是:抗原或抗體能物理性地吸附於固相表面,並且保持其免疫活性;抗原或抗體能與酶通過共價鍵形成酶結合物,同時保持各自的免疫活性或酶活性;酶結合物與相應的抗原或抗體結合後,能通過加入底物的顏色反應來確定免疫反應的發生,顏色反應的深淺與標本中相應抗原或抗體的量成正比。

簡述酶聯免疫吸附試驗(elisa)的原理。

2樓:考試資料網

基本原理是把抗原或抗體在不損壞其免疫活性的條件下預悶棚先結合到某種固相載體表面,測定時,將受檢樣品(含待測抗體或抗原)和螞謹則酶標抗原或抗體按一定程式與固相載體上的抗原抗體起反應形成抗原或抗體複合物;反應終止時,固相載體上酶標抗原晌老或抗體被結合量(免疫複合物)即與標本中待檢抗體或抗原的量成一定比例,經洗滌去除反應中的其他物質,加入酶反應底物後,底物即被固相載體上的酶催化成為有色產物,最後通過定性或定量分析有色產物量即可確定樣品中待測物質含量。

什麼是酶聯免疫吸附法?

3樓:中國農業出版社

酶聯免疫吸附法(enzyme:linked:immunosorbent:

assay,elisa)是把抗原—抗體的免疫反應與酶的催化反應相互結合而發展起來的一種綜合性技術,它的靈敏度高,特異性強,特別是當寄主體內病毒濃度很低或同時存在病毒鈍化物或抑制劑時,它的優勢尤為明顯,因而是近年來病毒檢測方法中發展最快、應用最廣的一種方法。

此方法的原理是利用以酶標記的特異抗體來指示抗原—抗體的結合,從而檢出樣品中的抗原。

具體操作程式是:將待檢植物汁液(抗原)注入酶聯板(聚苯乙烯多孔微量反應板)中,使抗原吸附於它的孔壁,然後加入以酶標記的特異抗體,待抗原與抗體充分反應後,洗去未與抗原結合的多餘酶標記抗體,於是在固相載體酶聯板表面就只留下以酶標記的抗原—抗體複合物。這時加入酶的無色底物,複合物上的酶催化底物降解,生成有色產物,其強度與病毒濃度呈正比。

這一結果可用肉眼識別,也可用分光光度計對底物的降解量進行測定。

酶聯免疫吸附測定實驗(elisa)的操作流程,謝謝大家

4樓:匿名使用者

(1) 加入50ul的標準品或樣品於所設定的孔中;

2) 在每孔中加入100ul一抗, 輕輕搖動微孔板混勻1分鐘;

3) 室溫(避光孵育30分鐘;

4) 洗板3次,每次加入250ul 1×洗液,最後一次儘量甩幹並在吸水紙上吸乾;

5) 每孔加入150ul1×二抗(避免陽光直射和工作臺溫度過低,孵育時適當覆蓋微孔板);

6) 室溫(避光孵育30分鐘;

7) 洗板3次,每次加入250ul1×洗液,最後一次儘量甩幹並在吸水紙上吸乾;

8) 加入100ul的tmb底物(底物本身無色,出現顏色變化不能使用);

9) 室溫(避光孵育孵育10-15分鐘,加入100ul的終止液終止反應,在450nm下讀od值(讀數前使用無絨布擦拭微孔底部水分和指模)。

博奧通科科技(北京)****。

酶聯免疫吸附試驗(elisa)的基本原理。

5樓:考試資料網

把抗原或抗體在不損壞其免疫活性的條件下預先結合宴兄運到某種固相載體表面,測定時將受檢樣品(含待測抗體或塵遊抗原)和酶標抗原或抗體按一定程式與結合在固相載體上的抗原或抗體起晌梁反應形成抗原或抗體複合物,反應結束時,固相載體上酶標抗原或抗體被結合量即與標本中待檢抗體或抗原的量成一定比例,洗滌除去反應液中其他物質,加λ酶反應底物後,底物即被固相載體上的酶催化變為有色產物,通過定性或定量分析有色產物量即可確定樣品中被測物質含量。

試述酶聯免疫吸附試驗(elisa)的原理。

6樓:考試資料網

將抗原包被仔猛於固相載體,加入待測血清後,如其中含有相應抗體,可與包被抗原結合。洗去不參與反應的無關蛋白成分後,再加入酶標記的第二抗體或酶標記抗原,使與待測抗體反應,在固念蘆橋相載體上形成抗原一待測抗體一酶標記抗抗體或抗原一待測抗體一酶標記抗原的複合物。待加入底物後,酶催化底物,產生呈色物質。

根據著色深淺,可判定待測抗體的有無及含量。如檢測igm類抗體,可譁瞎用抗μ鏈抗體包被固相載體,再依次加入待測血清、抗原、酶標記的針對抗原的特異抗體。如檢測抗原,可採用抗原捕獲(雙抗體夾心)elisa。

除此之外,elisa還有很多其他的演變方法,如競爭抑制法等。