東西的純度會影響消旋出峰嗎

2025-05-22 15:05:06 字數 3500 閱讀 7897

1樓:布兜新

色譜柱矽膠純度。

含金屬離子雜質的矽膠需要採用高濃度離子對試劑(如tfa)維持良好的峰形。

微粒。通過與柱內填充微粒疏水表面的相互作用實現蛋白與多肽的分離。

柱內填充粒通常以矽膠為基礎,這是因為矽膠的穩定性高,能夠在大多數溶劑條件下(除了ph大於的情況)保持穩定;此外,矽膠可以形成各種大小的具有不同直徑的多孔球形顆粒。

矽膠純度會影響多肽的峰形,尤其是加入的離子對試劑濃度較低時。高純度矽膠所需離子對試劑的濃度遠比低純度矽膠低。

低濃度tfa會導致峰形較差且解像度下降。矽膠純度較高時(圖b),的低濃度tfa會產生良好的峰形。

這在液相色譜-質譜聯用法中尤其重要,因為在使用電噴霧介面時tfa會導致訊號減弱。液相色譜-質譜聯用法中低濃度的tfa會獲得更好的檢測訊號。

孔徑。通常,反相液相色譜法中小孔(~100埃)矽膠分離蛋白的效果較差。

大孔矽膠允許更大的多肽進入小孔,從而與疏水介面充分作用,因此zui終的峰形更好,解像度更高。

由蛋白酶水解等產陵鎮埋生的小分子肽能夠進入小孔矽膠的孔隙內,從而與疏水介面相互作用;但是大孔矽膠也能較好地分離多肽,且具有不同的選擇性和解像度。

疏水介面。用碳氫化合物分子對矽膠進行改性,從而形成疏水介面。含烴鏈的氯矽烷,如十八烷基氯矽烷,與矽膠(表面有ji性矽烷醇基)反應使碳氫化合物附著在矽膠表面。

由於位阻效應,有機矽烷分子jin與矽膠表面部分矽烷醇基反應,因此大量的ji性矽烷醇基仍然會留在矽膠表面。

在「旅褲封端」過程中,較小的有機矽烷依次與ji性矽烷醇基反應,從而減少矽膠表面極性矽烷醇基的數量。選擇分離表面。矽膠表面改性所用的化學過程允許多種有機基團附著在矽膠表面。

常見的改性是鍵合一條十八碳線性脂肪鏈,形成「c18」柱或ods柱。c18柱尤用於分子量小於2~3000道爾頓多肽的分離,並且通常是分離由蛋白酶水解蛋白產生的多肽以及分離天ran和合成肽的選擇柱。

由丁基鍵合至矽膠表面形尺螞成的疏水相較少,可用於分離大分子肽或疏水性肽。

其它用於多肽分離的柱包括苯基柱,其在疏水性方面與c4柱類似,是一種ji性嵌入或ji性封端柱,能夠增強多肽與矽膠粒子表面的相互作用。因此,對多肽具有不同的選擇性。

2樓:錢苦思漸找

旋光度可以判斷液體有機化合物的純度。

光用物理量很難判斷樣品的純度,用各種光譜還行有可能,單用旋光夠嗆,很多東西都有旋光性,混合起來無法區分是誰的貢獻。尤其是多種旋光物質精心復配,可以得到各種旋光值。

旋光法可用於各種光學活性物質的定量測定或純度檢驗。將樣品在指定的溶劑中配成一定濃度的溶液,由測顫並得的旋光度算出比旋光度,與標準比較﹐茄稿跡或以不同濃度溶液製出標準曲線﹐求出含量。

條件。物體具有旋光性,其結構不能具有空間反演不變的性質。對於分子可以隨機朝向的多晶或者溶液,分子必須具有手徵性。

由於有機分子本身的手徵性導致的旋光性稱為內旋光,內旋光分為左旋光和右旋光性,但如果一種物體內部同時具有左右旋光或物體分子本身結構具有相反的手性,則物體不表現旋光性。

由於物體內部同時具敬巧有左右旋光的分子而不表現旋光性稱為外消旋性,而分子本身結構具有相反的手性而不表現旋光性稱為內消旋性。

於 2021-12-21

峰純度和峰高的關係

3樓:瀦小胖

沒有關係。1、峰純度是裡面沒有包埋了其他物質的峰,而峰高是峰的最高點到峰底的距離,所以峰純度和峰高並沒有關係。

2、峰純度是多次改變測試條件的方式去判定,而峰高是在柱後出現濃度極大時的檢測訊號。

化合物純度不夠會影響生物活性

4樓:晚風風

化合物純度不夠是會影響生物活性的。化合物純度的鑑定方法,主要來之於幾點激褲稿。

1、通過tlc的純度的鑑定。

2、通過熔程判斷純度,原理很簡單,純化合物,熔程很短,混合物熔點下降純拍,熔程變長。

3、基於hplc的純度鑑定,對於hplc因為常用的系統較少,加之其分離效果好,一般不要求選擇三種分子間作用力不同的溶劑系統,只要求選這三種不同極性的溶劑系統,使目標峰在不同的保留時間出峰。

4、基於軟電離質譜的純度鑑定。

5、基於核磁共振的純度鑑定,從氫譜中如果發現有很多積分不到一的小峰,就有可明孝能是樣品是樣品中的雜質。利用門控去偶的技術通過對碳譜的定量也能實現純度鑑定。

氨基酸溶液濃度會影響洗脫曲線峰的高度嗎

5樓:保險出金

影響。

影響梯度洗脫豎姿的因素有:1、溶劑的純度要高,否則會使梯度洗脫的重現性變壞。2、梯度混合的溶劑互溶性要好,應防止不互溶的溶劑進入色譜柱。

3、注意溶劑的粘度和密度對混合流動相組成的影響。4、梯度洗脫應使用對流動相組成變化不敏感的凳纖咐選擇型檢測器,而不能使用對流動相組成變化敏感的通用型檢測器。

當ph降低(<pi)時,氫離子。

與羧基結合,使氨基酸。

帶正電,當ph公升高(>pi)時,氫離子從氨基棗純上脫離,使氨基酸帶負電。

色譜分離為什麼會出現正峰,反峰,交叉峰,獨立峰,拖尾峰

6樓:浦恐

正峰:由於流動相中含有待檢測物質,而造成對某一波長檢測光吸收增加,從而被檢測器檢測到,從而形成正峰。這是正常的現象。

負峰:由於流動相濃度不均或存在氣泡,導致流動相對某一波長檢測光吸收減少,從而被檢測器檢測到,從而形成負峰。

交叉峰:由於流動相中含有兩種保留時間相近待檢測物質,在第一種物質尚未完全經過檢測器時後一種物質已經開始被檢測器檢測到,從而形成交叉峰,或成為重疊峰。

獨※立峰:單獨的物質通過檢測器,從而產生乙個單一的峰。這是正常現象。

拖尾峰:由於色譜柱填柱不均或固定相混有雜質,導致某一物質和固定相的保留時間變得不等,這樣會使得在大量該物質通過檢測器後,還有少量該物質不斷經過檢測器,從而造成拖尾峰。拖尾峰是柱效下降的標誌之一。

以上皆是個人手寫。請以後的不要抄襲。

7樓:網友

正峰的出現是物質對檢測波長的吸收,是正常現象。

反峰是因為濃度不均勻或者過大,造成檢測吸收減少或者超出範圍所致。

交叉峰是因為兩種物質出峰時間接近造成,可修改引數如壓力以及流動相比例等解決,必要時減少注射量。

獨立峰是因為物質純度較高,是正常現象。

拖尾峰是因為色普柱有較多的left over所致,需要更換或保養,用小流量沖洗40分鐘看看。

8樓:笨笨的弟弟

簡單說,這些峰都是測定藥物的依據,都過這些峰來確定藥物的性質。

高效液相色譜儀測樣品純度時候的峰高由哪些因素決定

9樓:馬紮燈絲

影響因素很多 樣品濃度 保留時間 流通池長度 流動相(水相和有機相的比例) 進樣量 檢測波長 等。

10樓:網友

樣品濃度,樣品在檢測波長下的吸收度,出峰時間。

11樓:上海波粒儀器

看檢測器型別,一般是濃度決定。

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