流式細胞儀測dna含量具體步驟怎麼調

2022-09-19 14:37:02 字數 1170 閱讀 5245

1樓:匿名使用者

用於**細胞週期,細胞固定後,加入pi等%bg梢越岷螪na的螢光染料。處於s1期的細胞有乙個峰,s2期的細胞dna量多一倍,有另外乙個峰。而s期的則位於2峰之間。

凋亡的細胞由於dna被降解,所以出現於第乙個峰之前。

dna提取出來後就不能用流式檢測了

流式細胞儀能夠測定dna的含量麼

2樓:程祖福

完全可以的。王金髮的《細胞生物學》上就說過。但我還沒有用過那東西。

3樓:

能檢測相對含量吧

給細胞dna染色然後過流失檢測螢光強度

流式細胞儀測定細胞週期各時相的原理和基本步驟(不用說具體使用的量)

4樓:匿名使用者

在細胞培養液中加入模擬核苷酸edu (比較老的方法也可以用brdu)。培養一小時 後,更換為正常的培養液繼續培養。模擬核苷酸可以像天然核苷酸一樣被細胞攝取並整合入新合成的dna。

培養一段時間後(一般小於乙個細胞週期),固定細胞。根據所使用模擬核苷酸的不同,使用不同的方法。edu,改變緩衝液的ph值,就會發出螢光。

而brdu則需用螢光抗體識別,需要對細胞膜和核膜進行通透處理。

再加入pi對dna染色。

在二維座標圖上,橫座標設為線性pi螢光強度,縱座標設為模擬核苷酸的螢光強度(log)。

典型的圖就像下面一樣:

g1, g2 和s期就按照圖中的劃分來做。g1期的細胞沒有新合成dna,所以brdu訊號是陰性,而pi的訊號位於1倍體期。s期是正在合成dna,所以brdu都是陽性。

g2期是已經合成好了2倍的dna,所以位於2倍體期,訊號是g1期的一倍。這個圖中,g1 pi訊號是300, g2就是600.

怎樣利用流式細胞儀檢測dna損傷?需要試劑盒嗎? 5

5樓:匿名使用者

那個 "流式細胞儀" 提供的功能是可以分離或處理單個細胞, 是細胞學水平的東東; 而 "檢測dna損傷" 儘管比較泛泛但也是瞄準亞細胞內分子群的, 當屬分子生物學水平的東東, 若有現成 "試劑盒" 肯定會省事兒不少, 但需要根據具體目標而定方向 ...

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