有哪位大神知道此圖叫什麼,是用ELISA資料做統計得到的正常

2021-03-21 13:12:32 字數 4937 閱讀 7691

1樓:匿名使用者

箱形圖(英文:box-plot),又稱為盒須圖、盒式圖、盒狀圖或箱線圖,是一種用作顯示一組資料分散情況資料的統計圖。因型狀如箱子而得名。

在各種領域也經常被使用,常見於品質管理。不過作法相對較較繁瑣。

請教:如何用elisa評價抗血清的效價

2樓:南京金益柏生物科技****

對照血清可形成梯度,是因為對照血清與包板的抗原量在所檢測的範圍內呈線性;待檢血清不呈線性,最有可能就是該血清與包板的抗原量不匹配。

總ige檢驗結果為20.2是什麼意思?

鹼性磷酸酶在人體中起什麼作用,過多有什麼影響? 30

elisa裡一抗和二抗的區別

酶標板的蛋白質吸附性怎麼測是用elisa嗎

3樓:匿名使用者

elisa檢測系統可謂是免疫學反應應用到科研生產中最為廣泛最為靈敏的技術手段。可是在新老手操作過程中總是會出現或大或小的問題,本人在剛開始做elisa時就面臨很多困難,雖然有師兄師姐鋪路,但還是常常做得一塌糊塗,比如說花板,假陽性,全顯色,全部顯色,顯色比空白還低。。。。。。自己也為此苦惱過很長一段時間,隨著自己技術水平得提高,或多或少地也掌握了elisa體系的脾氣,也是熟能生巧吧,現在做方陣,做elisa已是輕車熟路了,以前檢測一種抗體用整整一下午還算得暈暈的,現在給我十個八個的從包被到顯色,乙個工作日基本搞定。

下面就由我拋磚引玉地來說一下,做elisa的經驗總結:

1、包被原的性質很重要,蛋白濃度,是否降解,這關係到你做出的抗體可不可以被其識別,所以儲存抗原很重要,我做重組蛋白時,師兄都嚴格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。還有有的包被原可能不是蛋白,對於生物素和脂類物質或小分子物質我們要事先對其改造再加以包被,我把方法簡要的列出如下:

①親和素生物素:先親和素先包被載體,加入生物素化的dna,這種包被方法均勻、牢固,已擴大應用於各種抗原物質的定量測定。

②脂類物質:可將其在有機溶劑(例如乙醇)中溶解後加入elisa板孔中,開蓋置冰箱過夜或冷風吹幹,待酒精揮發後,讓脂質自然乾固在固相表面。

③小分子必須依靠和大的蛋白載體偶聯後才能固定在固相載體上。

2、包被液的選擇,一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩衝液。但有時由於試驗的需要,包被原的特殊性也可能採用中性的緩衝溶液來包。

應注意以下原理:由於蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的,靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用,這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響,大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團,故更易吸附到固相載體表面。具體的試驗還要有堅固的理論外也要實踐,看一下最終可不可以應用到自己試驗當中去。

常用的包被液除了剛才提到的ph9.6碳酸鹽緩衝液,還有ph7.2的磷酸鹽緩衝液和ph7-8的tris-hcl緩衝液等等。

3、封閉:繼包被之後用高濃度的無關蛋白質溶液再包被的過程。封閉就是讓大量不相關的蛋白質充填這些空隙,從而排斥elisa後的步驟中干擾物質的再吸附。

常用封閉劑有:0.05%-0.

5%的bsa;10%的小牛血清或1%明膠;脫脂奶粉,比較價廉,可以高濃度使用(5%-10%);還有一些稀有用到的各種動物血清(主要為了排除相似蛋白干擾)和酪蛋白等等。但最終選用什麼,要依據試驗具體來實踐。

4、洗滌板:可以說在elisa操作中,洗滌是最主要的關鍵技術。因為聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,為達到分離游離的和結合的酶標記物的目的,清除殘留在板孔中游離的物質,以及非特異性地吸附的干擾物質,在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。

所以在洗板時會有一定誤差,人為因素很大(當然有條件的用洗板機除外),洗的不徹底或串了孔,對如此靈敏的elisa系統可是不小的影響。

5、加抗體標本(和二抗):注意該換槍頭時換槍頭。標本稀釋一般可用pbs稀釋,也可用封閉液去稀釋。如需加二抗,還要注意二抗的工作濃度,太高浪費,太低則著色淺。

6、顯色:顯色系統又很多,我們一開始做的時候,要選擇適宜的顯色系統。注意顯色系統酶活性底物的儲存hrp結合物加硫柳幫浦,ap結合物可加疊氮鈉。

7、每次做盡量要把陰陽空三個對照做好,如出現問題也好分析。

請問elisa,所檢測一抗的效價怎麼求,我的實驗資料是1-6號為陽性,每次稀釋成之前的1|2

4樓:匿名使用者

記錄結果有下列幾種方法:

1、「+」或「-」:所有超過規定的o.d值(如o.

d,0.4)的標本均屬陽性,此規定o.d值是根據事先測定大量陰性標本所取得的,此規定值是陰性標本的上限。

或者以一組陰性標本o.d平均值加2~3個標準差作為陽性閾值。

2、直接以o.d值來表示,如0.4、0.7、1.2,o.d值越大,陽性反應越強,但此數值是在固定實驗條件下得到的結果,而且每次實驗都要有參考標本作對照。

3、以終點滴度表示:將標本作連續稀釋,最高稀釋度能出現陽性反應者(即od值仍大於陽性閾值,即為該標本的滴度。

4、以「比值」表示:求出被檢標本的o.d值與一組陰性標本o.

d值的比值,例如為陰性標本的2倍或3倍,即為陽性,比值小於2.1而大於1.5為可疑,<1.

5為陰性。

測定標本o.d值-空白o.d值

—————————————≥2.1

陰性對照o.d值-空白o.d值

如在此測定時以空白校正「o」點。

5、以「單位」來表示:在測定被檢標本的同時,再測定乙個含已知單位數的陽性參考血清,用不同稀釋度作elisa檢測後,以o.d值為縱座標,單位數為橫座標,畫出標準曲線。

以後可根據被檢標本的o.d值,從曲線上找出相應的單位數,再乘於血清的稀釋倍數,即可得出被檢標本的單位數。

作試驗時的陰性參考血清最好不要顯色,否則會對結果判斷帶來困難,特別在目測時,當陽性標本o.d值》2.0時,應作適當稀釋後再作測定。

抗精子抗體(elisa):血清(+)是什麼意思

5樓:匿名使用者

**系列的檢測和血清asab存在密切的關係。精子做為一種同體或異體的抗原所產生的免疫應答反應,主要取決於精子本身抗原性的強弱及免疫功能的高低。

血清(+)表示陽性,表示此檢測結果正常,不過單做這乙個檢測來確定不育原因是不可靠的。

6樓:匿名使用者

體內有針對精子的自身抗體,很可能不育

elisa,陰性對照,陽性對照及空白對照是怎麼回事

7樓:南京金益柏

什麼是「有效性」(validity)?要獲得準確的檢測結果「有效性」評價,就會關係到:為什麼要設定「陰性、陽性和空白」等不可缺少的三項對照?

要用什麼樣的物質擔當「陰性、陽性和空白對照(品)」?這「三項對照」如何設定、需要設定幾個孔位?獲得的測定值如何「認可、取捨與計算」?

隨後,又如何依照陽性對照均值(pcx)與陰性對照均值(ncx)的差值(p-n,或n-p)大小做出「試驗結果有效性」的最終裁決呢?…等等。

elisa檢測,按照試劑說明書要求,每次試驗、每塊扳上都要設定以下3項對照和用途:

2.陰性對照(品):

(1)陰性對照(品)的概念與要求:所謂陰性對照(品),應當是本項檢測試驗中採用與待撿物(樣品、人用試劑就是人的血清等)具有同源性和同質性,又不含有待檢物質,並能客觀比較和鑑別處理因素(血清免疫學試驗中有特異性抗原與抗體反應)之間的差異。因此,用動物血清或其製品(如牛血清白蛋白等)代替陰性人血清作為對照品,從理論和實踐上都是不可取的,弊端甚多,無須細述。

注意:據我所知,國產elisa試劑中,有的廠牌是用動物血清製品稀釋配置、或與部分人血清混合配置的;其二,陰性對照讀數,並非是「越低越好」。ncx值接近0.

00x水平,這是假象!試想一下,真正採用「陰性人血清」的陰性對照品,ncx值會如此之低嗎?舉個例子,雅培B肝六項eia試劑的ncx值,分別為:

0.010(hbsag)、0.027(抗—hbs)、0.

035(hbeag)、1.083(抗—hbe)、1.065(抗—hbc)、0.

045(抗hbc-igm)。生物梅里埃的hiv試劑ncx是0.091。

辨別試劑ncx值是否合理的乙個很簡單的方法,只要對比大量陰性樣本的實際讀數就「一目了然」啦!

乙個題外插曲:表明elisa試劑內在質量的乙個重要統計標誌,就是要看:陰性樣本的的上限不應當大於、必須小於c.

o.i.=1.

00;反之,陽性樣本的的下限不可小於、應當大於c.o.i.

=1.00!

(2)陰性對照(品)分為兩類

一是代表受檢人血清中並不含有、或方法學靈敏度未能檢出的待檢物的基準水平,並且是結果判斷值(cut off)計算式中決定「是」(陽性)、或「否」(陰性)的唯一可變值。陰性對照值高,導致假陰性;反之,導致假陽性。如:

hbsag、hbeag、抗—hbc等。二是陰性對照設定,在方法學上要求加入指示性定量標準品,如中和劑hbeag,定量hbcag等,用以檢測抗—hbe、抗—hbc。或者,選取代表平均水平的正常人血清用作陰性對照,如檢測抗—hbc igm。

此類cut off 值計算時,多數均包括陰性和陽性對照值2個可變值。

3.陽性對照(品):

(1)陽性對照(品)的概念與要求:同陰性對照(品),只是採用「精選」的含有待檢物質的人血清製備而成。所謂「精選」,就是把收集的陽性人血清經過數種試驗進行「篩試」、把含有「干擾性物質」的血清剔除、不用,以避免出現「假陽性」干擾試驗結果。

(2)陽性對照(品)設定,也可區分為兩種型別與用途:

一是陽性對照主要用於評價該項試驗結果是否有效和試驗結果的穩定性與可比性。而所設的陽性對照的測量值不列入cut off值計算、但是不可不做。如hbsag、抗—hbs、hbeag等。

二是陽性對照的設定,不僅用於評價試驗結果是否有效和試驗結果的穩定性與可比性,而且計入cut off的計算。此時的cut off值的含義是代表該標誌物在健康(正常)人群中正常值範圍的上限。待檢樣本檢測值超過該上限(cut off)時表示有診斷意義。

例如抗—hbe、抗—hbc、抗—hbc igm等。

哪位大神知道這花叫什麼,哪位大神知道,這圖片上的花叫什麼名字?

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有哪兒位大神知道此圖出自什麼動畫

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哪位大神知道這只貓叫什麼,想要這個系列的圖圖

樓主你好 這個表情是 惡搞貓 內 其他圖 容 有哪位大神知道這只貓怎麼搜尋?沒有什麼品種特徵,就是個土貓,看體型在四個月以內。請問這 上這只貓叫什麼貓,我想找關於這只貓的 全是copy貓表情 無誤請採納 我想知道這只貓叫什麼名字,還有沒有這一系列的 有的話請發下,謝謝。這個貓來咪是 自 貓咪bai ...