氯化鈣法製備的感受態能不能用來轉連線產物

2021-03-03 20:47:01 字數 766 閱讀 8043

1樓:阿魯巴星人

可以的。只要轉化效率高於10的6次方就可以做簡單的連線產物轉化。

做農桿菌感受態的20mm的氯化鈣怎麼配置

2樓:阿魯巴星人

20mm應該是20mm吧?

配置20mm氯化鈣首先你要看你的氯化鈣是無水氯化鈣還是氯化鈣的水合物,根據其分子量進行計算。

假設你的cacl2.nh2o分子量為n,則配置 1l 20mm 的cacl2需要加 n*20/1000 g cacl2.nh2o

以此類推

本人新手,連線產物轉化時,流程上都是說200微公升感受態細胞10微公升連線產物

3樓:匿名使用者

一般基因連線t載體的話可以用5 ul的連線產物加到100 ul甚至50 ul的感受態細胞中,如果是基因連線其他表達載體最好用10 ul吧。效率主要看連線的效率和感受態細胞的效率。實際操作中,會將長出來的菌落挑5個進行菌落pcr,已經鑑定陽性菌落。

cacl2法制感受態細胞:最近用此法製備感受態細胞,但是轉化後的效率很低,幾天看看平白機會乙個沒有長。

4樓:匿名使用者

首先要掌握好培養時間,細胞對數生長期的時候再做,一般od600為0.5左右。其次,在製備的時候要注意一定要整個過程都在冰上,保持低溫很重要,特別是離心過程,冷凍離心機要先預冷後再用。

實在不行試試冰浴水洗法吧,操作簡單而且電擊轉化效率很高的。

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你可以在活化菌培養兩小時過後,每隔二十分鐘測一下od值.這樣還是比較好的,各個批次的菌生長也是不同的.理工學科是什麼 理工學科是指理學和工學兩大學科。理工,是乙個廣大的領域包含物理 化學 生物 工程 天文 數學及前面六大類的各種運用與組合。理學理學是中國大學教育中重要的一支學科,是指研究自然物質運動...

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分子式 cacl2 性質 無色立方結晶。一般商品為白色多孔塊狀或粒狀 蜂窩狀。無臭,味微苦。密度2.15g cm3。熔點782 沸點1600 易溶於水,溶於醇 丙酮 醋酸。在常溫下由水溶液析出六水氯化鈣結晶,加熱至200 時變成二水物,繼續加熱至260 變成白色多孔狀的無水氯化鈣。吸濕性極強,暴露於...

氮化鎂加水產生什麼氯化鈣加氨氣產生什麼

mg3n2 6h2o 3mg oh 2 2nh3 cacl2 2nh3 2h2o ca oh 2 nh4cl 3cacl2 2nh3 ca3n2 6hcl 實際上是個平衡反應,用雙箭頭等號更合適一點,因為不是所有反應物都會轉換。mg3n2 6h2o 3mg oh 2 2nh3 cacl2 2h2o ...