如何驗證多轉殖細胞中的目的基因,專業的請解釋下,多轉殖B細胞

2021-03-03 21:19:57 字數 3045 閱讀 5226

1樓:匿名使用者

基因轉殖來技術包括了一系列技術,它源

大約bai建立於70年代初期。美國斯坦du福大zhi學的伯格(p.berg)等人於2023年把一dao

種猿猴病毒的dna與λ噬菌體dna用同一種限制性內切酶切割後,再用dna連線酶把這兩種dna分子連線起來,於是產生了一種新的重組dna分子,從此產生了基因轉殖技術。2023年,科恩(s.cohen)等人把一段外源dn**段與質粒dna連線起來,構成了乙個重組質粒,並將該重組質粒轉入大腸桿菌,第一次完整地建立起了基因轉殖體系。

一般來說,基因轉殖技術包括把來自不同生物的基因同有自主複製能力的載體dna在體外人工連線,構建成新的重組dna,然後送入受體生物中去表達,從而產生遺傳物質和狀態的轉移和重新組合。因此基因轉殖技術又稱為分子轉殖、基因的無性繁殖、基因操作、重組dna技術以及基因工程等。

專業的請解釋下,多轉殖b細胞?

2樓:匿名使用者

小淋巴細胞常來為多轉殖b細胞。表自達igm和igd。也可有少量多轉殖t細胞,常常圍繞變異型r-s細胞成玫瑰花狀。

對變異型r-s細的分子研究顯示爆公尺花樣細胞具有轉殖性免疫球蛋白基因重排,從而證實了其**於生髮中心或生髮中心後的b淋巴細胞。

3樓:匿名使用者

轉殖就是用遺傳基因模仿出令乙個有生命的物體

b細胞多轉殖活化是怎樣的

4樓:匿名使用者

小淋巴細胞常為多轉殖b細胞。表達igm和igd。也可有少量多轉殖t細胞,常常圍繞

專變異型r-s細胞成玫瑰花屬狀。對變異型r-s細的分子研究顯示爆公尺花樣細胞具有轉殖性免疫球蛋白基因重排,從而證實了其**於生髮中心或生髮中心後的b淋巴細胞。

在t細胞分泌的淋巴因子的作用下,b細胞增殖分化形成漿細胞和記憶細胞,這樣b細胞就被活化了。 體液免疫的過程大致如下: 體液免疫三個階段。

感應階段 抗原進入機體後,除少數可以直接作用於淋巴細胞外,大多數抗原都要經過吞噬細胞的攝取和處理...

獲取目的基因的方法有哪些(詳細)

5樓:奔三不再二

獲取目的基因的方法主要有兩種:

一是從供體細胞的dna中直接分離基因,最常用的方法是「鳥槍法」又叫「散彈射擊法",另一種是人工合成基因,這種方法有兩條途徑,

二是以目的基因轉錄的信使rna為模板,反轉錄成互補的單鏈dna,再在酶的作用下合成雙鏈dna,即目的基因,另一條途徑是蛋白質的氨基酸序列,推測出信使rna序列,再推測出結構基因的核苷酸序列,然後用化學的方法以單核苷酸為原料合成.

6樓:匿名使用者

..剛好學到

基因工程流程的第一步就是獲得目的dn**段,如何獲得目的dn**段就成為基因工程的關鍵問題。所需目的基因的**,不外乎是分離自然存在的基因或人工合成基因。常用的方法有pcr法、化學合成法、cdna法及建立基因文庫的方法來篩選

直接獲取

1.從基因文庫中獲取 這個沒什麼就是現成的基因儲存在受體菌上你用的時候提取出來就好了(基因組文庫法 就是原教材中的用限制性內切酶直接獲取。利用λ噬菌體載體構建基因組文庫的一般操作程式如下:

1 選用特定限制性內切酶, dna進行部分酶解,得到dna限制性片段2 選用適當的限制性內切酶酶解λ噬菌體載體dna。3 經適當處理,將基因組dna限制性片段與λ噬菌體載體進行體外重組。4 利用體外包裝系統將重組體包裝成完整的顆粒。

5 以重組噬菌體顆粒侵染大腸桿菌,形成大量噬菌斑,從而形成含有整個dna的重組dna群體,即文庫。)經典解釋

2.cdna文庫法(即原教材中提到的逆轉錄法)。cdna文庫,是指匯集以某生物成熟mrna為模板逆轉錄而成的cdna序列的重組dna群體。

雖然可用基因組文庫法來獲取真核生物的目的基因,但是由於高等真核生物基因組dna文庫比其cdna文庫大得多,相關工作量同樣大得多。更為重要的是,在真核生物基因組中合有大量的間隔序列或內含子,但在大腸桿菌等原核生物中沒有類似序列的存在,所以大腸桿菌不能從真核生物基因的初級轉錄本中去除間隔序列,即不能表達真核生物dna。而在真核生物成熟mrna中已不存在間隔序列(已在拼接過程中被去除),所以可以以真核生物成熟mrna為模板,逆轉錄而成的cdna可被大腸桿菌表達。

因此,在基因工程中,cdna文庫法是從真核生物細胞中分離目的基因的常用方法。

3.直接分離基因最常用的方法是「鳥槍法」,又叫「散彈射擊法」。這種方法有如用獵槍發射的散彈打鳥,無論哪一顆彈粒擊中目標,都能把鳥打下來。

鳥槍法的具體做法是:用限制酶(即限制性內切酶)將供體細胞中的dna切成許多片段,將這些片段分別加載運載體,然後通過運載體分別轉入不同的受體細胞,讓供體細胞所提供的dna(外源dna)的所有片段分別在受體細胞中大量複製(在遺傳學中叫做擴增),從中找出含有目的基因的細胞,再用一定的方法吧帶有目的基因的dn**段分離出來。如許多抗蟲,抗病毒的基因都可以用上述方法獲得。

用「鳥槍法」獲取目的基因的優點是操作簡便,缺點是工作量大,具有一定的盲目性。

人工合成

1.(主要是序列已知的基因)。主要是通過dna自動合成儀,通過固相亞磷酸醯胺法合成,具體過程可以網上查詢,反正是可以按照已知序列將核苷酸乙個乙個連線上去成為核苷酸序列,一般適於分子較小而不易獲得的基因。

對於大的基因一般是先用化學合成法合成引物,再利用引物獲得目的基因。

2.聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction ,pcr)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重複性好、易自動化等突出優點;能在乙個試管內將所要研究 的目的基因或某一dn**段於數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛髮、一滴血、甚至乙個細胞中擴增出足量的dna供分析研 究和檢測鑑定。

過去幾天幾星期才能做到的事情,用pcr幾小時便可完成。pcr技術是生物醫學領域中的一項革命性創舉和里程碑

他只是給目的基因的擴增

好累~....

7樓:abc高分高能

如何從基因文庫中獲取目的基因

8樓:糟油酒丸

請看擺渡百科「人工合成基因」條目。

直接獲取的。。。用引物pcr出來--請看擺渡百科「分子轉殖」條目。

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